晚期NSCLC預后分子指標的探索：血清miRNA表達特征及其與組織表達的相關性分析.pdf

1、目的：研究晚期非小細胞肺癌患者血清microRNAs表達水平與臨床預后的關系，并分析組織microRNAs與血清microRNAs相對表達量的相關性。體外檢測相關microRNAs細胞毒性及對細胞侵襲轉移能力的影響，為靶向于目標miRNAs的臨床治療提供實驗室依據(jù)。
　　方法：將68例晚期NSCLC患者血清隨機分組為訓練集（34例）和驗證集（34例）。通過對已證實的可手術的非小細胞肺癌預后相關的組織miRNAs及血清miRNAs在

2、晚期NSCLC患者的血清中行qRT-PCR檢測，行單因素Cox回歸分析及ROC曲線分析血清miRNAs與晚期NSCLC患者PFS的關系，建立風險公式，并行交叉驗證，繪制Kaplan-Meier曲線并行Log-rank檢驗。Pearson法在配對的組織和血清中行相關miRNAs表達量的相關性分析。MTT法檢測相關miRNAs對H358及PC9細胞系的增殖抑制作用；細胞劃痕實驗和Transwell實驗檢測相關miRNAs對H358及PC9細

3、胞系的遷移侵襲能力的影響。
　　結果：對訓練集標本行單因素Cox回歸分析顯示hsa-mir-1、hsa-mir-30d-5p、hsa-miR-221-3p、hsa-miR-486-5p與晚期 NSCLC患者的PFS相關，風險分數(shù)=(-0.918×miR-1表達水平)+(1.336×miR-30d表達水平)+(0.864×miR-221表達水平)+(-0.712× miR-486表達水平)，中位PFS高風險組vs低風險組為85天vs

4、228天，P＜0.001。ROC曲線下面積為0.877，臨界值為0.518，靈敏度為0.941，特異度為0.706。中位PFS在驗證集中高風險組vs低風險組為85天vs151天，P=0.0029，在總體標本中為85天vs176天，P＜0.001。多因素Cox回歸分析示：吸煙狀態(tài)（P=0.037）和風險分數(shù)（P＜0.001）與患者PFS相關。在24例配對的組織中檢測miR-1、miR-30d、miR-221、miR-486相對表達量，行P

5、earson相關性分析，示miR-221（P=0.001）、miR-486（P=0.005）的血清和組織表達量呈正相關，miR-30d（P=0.082）血清和組織表達量無相關。體外實驗中，上調miR-221或下調miR-486可增加肺癌細胞系增殖、侵襲、轉移能力，下調miR-221或上調miR-486降低肺癌細胞系增殖能力，對侵襲及轉移能力的影響無統(tǒng)計學差異。
　　結論：hsa-mir-1、hsa-mir-30d-5p、hsa-m