水皰口炎病毒的M蛋白基因聯合熱療治療腫瘤的實驗研究.pdf

1、目的：M蛋白(matrix protein)是水皰口炎病毒(vesicular stomatitis virus，VSV)的最重要的結構功能蛋白，它可抑制宿主基因的表達、使宿主細胞變圓、在缺少病毒其他成分的情況下直接誘導腫瘤細胞凋亡。本實驗室采用的脂質體包裹M蛋白基因(Lip-MP)，已經初步證實其在體外和體內均通過誘導腫瘤細胞凋亡產生顯著的抗腫瘤活性。因此，M蛋白基因可以作為抗腫瘤的潛在基因。熱療(Hyperthermia，HT)是用

2、加熱方式治療腫瘤的一種方法，通過直接細胞毒作用、細胞凋亡效應、激發(fā)免疫反應及改變腫瘤內微循環(huán)，從而殺傷腫瘤細胞。腫瘤是全身性疾病，腫瘤治療不再是單一治療，綜合治療已成為趨勢。脂質體包裹M蛋白基因和熱療都具有較強的抗腫瘤效應，兩種治療手段的作用機制和毒副作用不完全相同，所以我們設想聯合應用M蛋白基因和局部熱療是否能更強的誘導腫瘤細胞凋亡，產生更強的抗腫瘤應? 方法：我們用DOTAP：Chol脂質體包裹M蛋白基因和質?？蛰d體制備脂質

3、體DNA復合物(Lip-MP和Lip-null)來進行抗腫瘤體內實驗。腫瘤模型選用的是Meth A纖維肉瘤BALB/c小鼠腫瘤模型和C'I、26結腸癌BALB/c小鼠腫瘤模型。具體治療方案是將兩種腫瘤模型分別予生理鹽水(NS)、單純熱療(HT)、Lip-null、Lip-MP、Lip-null加熱療和Lip-MP加熱療處理，每4天一次，共治療4次。治療期間，每4天測量小鼠腫瘤體積，觀察小鼠活動、食欲、皮毛等。治療結束后1周，處死5只小鼠

4、做病理切片，其余觀察生存期。 結果：在Meth A纖維肉瘤腫瘤模型中，Lip-MP加熱療導致更強的抗腫瘤效應，治療后32天腫瘤的體積明顯小于NS組、HT組、Lip-null組、Lip-MP和Lip-null加熱療組(P<0.05)，部分腫瘤完全消退。我們通過計算協(xié)同系數Q>1證明了Lip-MP和熱療有協(xié)同效應。Lip-MP加熱療組小鼠的生存期比其他組明顯延長(P<0.05)，而且在Lip-MP加熱療聯合治療組小鼠的殘存腫瘤中，凋

5、亡細胞明顯增多。在CT 26結腸癌腫瘤模型中，我們得到了與Meth A模型類似的結果。在治療28天后，Lip-MP加熱療組較其他組的腫瘤體積明顯減小(P<0.05)，小鼠生存期顯著延長(P<0.05)，病理切片凋亡也是大量增多的，從而進一步提示Lip-MP聯合熱療引起更強的抗腫瘤效應，兩種治療方法具有協(xié)同作用。 結論：我們的實驗結果表明Lip-MP聯合熱療能增強誘導腫瘤細胞凋亡，產生更強的抗腫瘤效應，為腫瘤綜合治療提供了新思路。