己酮可可堿對慢性吸煙小鼠肺免疫病理學的作用及其可能機制.pdf

1、肺內炎癥細胞的活化和免疫效應細胞的趨化是導致吸煙肺氣腫形成和發(fā)展的中心環(huán)節(jié)，同時一些信號通路也在其中起著重要的作用。我們的前期研究發(fā)現(xiàn)，己酮可可堿（PTX）干預可抑制豚鼠慢性吸煙肺氣腫的發(fā)生，并可能導致動物發(fā)生肺纖維化。Wnt/β-catenin信號通路是調控細胞生長、增殖和凋亡的關鍵途徑，該途徑的激活與人特發(fā)性肺間質纖維化-尋常型間質性肺炎（IPF/UIP）病變，以及肺纖維化的中心環(huán)節(jié)上皮-間充質轉化（EMT）過程密切相關。PTX對小

2、鼠是否也有類似的抑制吸煙肺氣腫形成和導致肺纖維化的作用，PTX抑制吸煙肺氣腫形成的免疫機制，以及PTX對Wnt/β-catenin信號通路的調控與其導致吸煙肺纖維化的關系尚未得到揭示。
　　 目的:探討PTX對慢性吸煙BALB/c小鼠肺組織病理學改變的影響及與IFN-g/IL-4因子表達的關系；探討PTX對干擾素誘導蛋白（IP-10）介導的CXCR3+Th1和Tc1細胞向吸煙動物肺內趨化的影響；探討PTX對慢性吸煙小鼠肺內Wnt

3、/β-catenin信號通路表達的影響及與肺纖維化的關系。
　　 方法:慢性吸煙和PTX干預BALB/c小鼠，觀察肺組織病理學改變。ELISA法檢測慢性吸煙和PTX干預動物肺泡灌洗液IFN-g、IL-4、IP-10表達和肺組織TGF-b1表達。ELISA法檢測PTX對香煙煙霧提取物刺激體外培養(yǎng)RAW264.7細胞表達IP-10的影響。免疫組織化學法檢測肺組織CXCR3陽性細胞。免疫組織化學染色和Western blot法檢測β-

4、catenin蛋白在動物肺組織內的表達。RT-PCR法檢測TCF-1和LEF-1表達。Western blot法檢測α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）表達變化。
　　 結果: PTX干預可導致慢性（4月）吸煙BALB/c小鼠發(fā)生肺纖維化，伴有IFN-g/IL-4因子比例逆轉。PTX干預可抑制吸煙（1周）BALB/c小鼠肺內IFN-g和IP-10表達，減少CXCR3+Th1和Tc1細胞數(shù)量，抑制吸煙對RAW264.7細胞表達IFN-

5、g和IP-10的活化作用。PTX可活化β-catenin蛋白在肺組織的表達和向胞漿內轉運，促進LEF-1基因和TGF-b1表達，但對cyclinD1蛋白表達和TCF-1基因表達水平無顯著影響。
　　 結論: PTX可阻抑慢性吸煙BALB/c小鼠形成肺氣腫，并在部分動物導致肺纖維化形成。該作用可能與調控Th1/Th2細胞因子平衡、抑制IP-10介導的CXCR3+Th1和Tc1細胞向肺內趨化，以及激活Wnt/β-catenin信號通