CRY1在人腦膠質瘤中的表達及意義.pdf

1、前言: 膠質瘤是顱內(nèi)最常見的原發(fā)腫瘤，約占顱內(nèi)腫瘤的40％-43％。近年來，隨著分子生物學、分子遺傳學等學科的發(fā)展，發(fā)現(xiàn)了許多與腫瘤發(fā)生，發(fā)展和預后密切相關的基因，并嘗試用基因治療的方法來改善膠質瘤的療效。生物晝夜節(jié)律普遍存在于各種生物體，由于生物節(jié)律基因的發(fā)現(xiàn)和對其活動規(guī)律的揭示，使對生物晝夜節(jié)律的研究獲得突破性進展。生物節(jié)律基因通過調控、干擾癌基因、抑癌基因、生物周期、血管內(nèi)皮生長因子及對于內(nèi)分泌通路的作用，多方面參與了腫瘤

2、的發(fā)生和發(fā)展。通過對腫瘤與晝夜節(jié)律、生物節(jié)律基因間關系的了解，使進一步研究明確晝夜節(jié)律的發(fā)生與腫瘤發(fā)生、發(fā)展有關的分子機制，對臨床腫瘤的診斷、判斷腫瘤的預后及轉歸等方面具有重要意義，為臨床應用腫瘤的時間治療提供了理論依據(jù)。 腫瘤的發(fā)生為多基因受累的結果，包括抑癌基因的失活和癌基因的活化兩方面。CRY1基因是在研究哺乳動物DNA修復光解酶過程中發(fā)現(xiàn)的，屬于植物藍光感受器和光解酶家族的成員，CRY1基因是一種主要的生物節(jié)律調控基因，

3、是反饋環(huán)唯一的負調節(jié)因子，對細胞調控基因表達的嚴格時間程序起了重要作用，尤其是維持了細胞自穩(wěn)態(tài)通路反饋環(huán)的正常工作，CRY1基因編碼的蛋白是一種核蛋白，能穩(wěn)定per蛋白的結構，能直接與PER蛋白結合將其從胞漿轉運至核內(nèi)，它們能通過與Clock-Bmall-Ebox直接或間接的相互作用抑制Clock-Bmall介導的基因轉錄，參與生物節(jié)律調節(jié)的負反饋環(huán)。后者影響抑癌基因(負向調控)失活或原癌基因(正向調控)表達，使其失去正常晝夜節(jié)律，進而

4、導致細胞癌變。通過對CRY1的深入研究有可能會發(fā)現(xiàn)它在參與腫瘤，尤其是膠質瘤的發(fā)生及進展等方面的重要作用，因此本研究目的在于通過檢測人腦膠質瘤組織中CRY1蛋白及mRNA的表達來明確其在人腦膠質瘤的發(fā)生及進展過程中的作用。 材料及方法: 本實驗采集62例臨床手術切除的不同部位腦膠質瘤組織標本以及15對照腦組織標本(腦外傷內(nèi)減壓術后標本)，腫瘤組織術前均未經(jīng)過放化療，送大體病理學檢查后標本立即置液氮內(nèi)速凍，-70℃貯存，用

5、以Western Blot及半定量RT-PCR方法檢測CRY1蛋白及mRNA的表達。 結果: CRY1蛋白及mRNA在人腦膠質瘤組織與對照腦組織中表達量有顯著性差異。在人腦膠質瘤組織中RT-PCR方法檢測CRY1 mRNA的相對表達量為1.91±0.23，在對照腦組織中CRY1 mRNA的相對表達量為2.77±0.16，Western Blot方法檢測膠質瘤中CRY1蛋白的相對表達量為1.87±0.33，對照腦組織中CR

6、Y1蛋白的相對表達量為2.94±0.46，在兩種組織中CRY1 mRNA及蛋白相對表達量差異具有顯著統(tǒng)計學意義，而且，CRY1基因在人腦膠質瘤組織中的過低表達與腫瘤病理分級相關，其中在Ⅲ-Ⅳ級膠質瘤組中的表達明顯低于Ⅰ級和Ⅱ級，隨腫瘤級別增加CRY1蛋白及mRNA表達均呈下降趨勢。 結論: 人腦膠質瘤組織中CRY1蛋白及mRNA表達水平均明顯降低，兩者結果一致，這種表達降低與膠質瘤的發(fā)生及臨床病理分級密切相關，CRY1可