CTGF對小鼠術后腹膜粘連形成的影響及機制的實驗研究.pdf

1、目的:
　　通過檢測小鼠術后腹膜粘連組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA及蛋白表達情況,探討結締組織生長因子(CTGF)在術后腹膜粘連形成過程中的作用及其機制。
　　方法:
　　105只昆明小鼠隨機分成正常對照組、假手術組、模型組,每組35只。正常對照組僅麻醉不作其他任何處理;假手術組小鼠麻醉后,切開進入腹腔,直接關腹;模型組制備成腹膜粘連模型。在術后分別于7個時間點(第3、6、9、12、15、1

2、8和21天)處死小鼠,每個時間點每組隨機各處死5只小白鼠,采取隨機雙盲法,對腹膜粘連程度進行評估,并留取標本,應用HE染色觀察病理變化、Masson,s三色染色觀察膠原沉積、RT-PCR法檢測標本組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA表達及免疫組織化學法檢測標本組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達。
　　結果:
　　1、術后各時間點正常對照組和假手術組觀察區(qū)均未形成粘連;模型組隨著術

3、后時間推移,腹膜粘連評分逐漸增高,粘連評分與術后時間遞增呈顯著正相關(r=0.718,P<0.05)。
　　2、各組標本組織中的膠原沉積:正常對照組與假手術組膠原沉積面積百分數無顯著差異(P>0.05),模型組膠原沉積面積百分數顯著高于正常對照組、假手術組(P<0.05),模型組膠原沉積面積百分數與術后時間遞增呈顯著正相關(r=0.981,P<0.05)。
　　3、各組標本組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的m

4、RNA表達:兩組間比較正常對照組與假手術組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA表達水平無顯著差異(P>0.05);模型組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA表達水平顯著高于正常對照組和假手術組(P<0.05);術后各時間點模型組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA表達水平均顯著高于正常對照組、假手術組(P<0.05)。模型組CTGF的mRNA表達水平與腹膜粘連評分呈明顯正相關(r=0.44

5、4,P<0.05);術后第3-18天 CTGF的mRNA表達水平與膠原沉積面積百分數呈顯著正相關(r=0.654,P<0.05);模型組CollagenⅠ與CTGF的mRNA表達水平呈顯著的正相關(r=0.787,P<0.05);術后第6-21天,模型組TIMP-1與CTGF的mRNA表達水平呈顯著正相關(r=0.665,P<0.05)
　　4、各組標本組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達:兩組間比較正常對照

6、組與假手術組 CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達水平無顯著差異(P>0.05);模型組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達水平顯著高于正常對照組和假手術組(P<0.05);術后各時間點模型組CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的蛋白表達水平均顯著高于正常對照組、假手術組(P<0.05)。模型組CTGF的蛋白表達水平與腹膜粘連評分呈顯著正相關(r=0.617,P<0.05);模型組CTGF的蛋白表達

7、水平與膠原沉積面積百分數呈顯著正相關(r=0.530,P<0.05);模型組CollagenⅠ與CTGF的蛋白表達水平呈顯著正相關(r=0.555,P<0.05);模型組TIMP-1與CTGF的蛋白表達水平有顯著正相關(r=0.850,P<0.05)。
　　結論:
　　1、小鼠術后腹膜粘連組織中CTGF、CollagenⅠ、TIMP-1的mRNA及蛋白呈高水平表達;
　　2、CTGF mRNA及蛋白表達水平隨腹膜粘連評