大鼠骨髓細胞誘導分化神經(jīng)細胞的演變和形態(tài)學研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學碩士學位論文大鼠骨髓細胞誘導分化神經(jīng)細胞的演變和形態(tài)學研究姓名：李戰(zhàn)輝申請學位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學指導教師：劉振華20040518大鼠曹髓細胞誘導分化神經(jīng)細胞的演變和形態(tài)學研究碩士研究生：李戰(zhàn)輝導努：裁擐摯【中文摘要】在蛋懿造盤韁綴中，存在造盤予緇粒(hematopoieticstemcells，HSCs)，及與造血干細胞的增殖和分化相適宜的環(huán)境，即造J1n微環(huán)境。造血微環(huán)境包括造皿組織中的基質(zhì)細胞(bonemarrow

2、stromalcells，BMSCs)、鏹照終基矮(extmcellularmarx，ECM)囂各摹孛造巍瓣予。囂髓細胞在不同的誘導條件下，其有向成骨細胞、成軟骨細胞、脂肪細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、神經(jīng)細胞及支持造血的鏨質(zhì)細胞等分化的能力。目的：探討大鼠全骨髓細胞體外培養(yǎng)的分化規(guī)律和分化形態(tài)。確定免疫膠俸金褥鋌曹髓綴巍l：冬方法瑟條孛。方法：粟矮大惑全囂戇綴麓接耱，冰蒸水裂解紅細胞，成用本實驗室的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)基進行裔血清條件下培養(yǎng)，

3、未加其它干預(yù)因素即誘導出神經(jīng)干細胞，進一步分化為神經(jīng)元秘毒孛經(jīng)膠矮綴照。采翅光鏡、掃接嗽鏡對由囂髓發(fā)騫成神經(jīng)緇胞的不同階段送行躐察，免疫嚷鏡以直徑為15nm的免疫膠俸金包逢后標記，馱超微結(jié)構(gòu)上對分化的細胞定位、定一陡。以及用免疫細胞化學和熒光激活細胞計數(shù)儀(FACS)檢測骨髓細胞在不同分化階段對神經(jīng)繃胞特異標遮穆——毒棗經(jīng)集蛋鑫(nestin)幫專毒經(jīng)孩蛋自(neuronalnuclei，NeuN)戇表達，觀察矮演變趨勢。結(jié)果：①骨髓細

4、胞演變形態(tài)觀察(光鏡)全骨髓細胞從成鼠股骨中分離獲得接種后5h見各種形態(tài)的細胞，其中較易分辨的衣褥大類，其一跫紅細胞，黧圓盤狀；另一類是數(shù)量較多胞體較大、圜靜綏施，半懸浮于榮莽滾中。5d后又冤囂大類緇庭，鍪少藹大的細胞球和形態(tài)相對均～的大圓細胞：此外，背疑是一些細胞碎片。大細胞球由許多小細胞組成，免疫細胞化學鑒定與周圍的大圓緗胞同性，表達nestin。tod霹煲瑟大殼隆球形態(tài)，主要冤大國爨貔綴袋鷙景一些形態(tài)備舜雜細胞。換液，復加5％胎牛