小細(xì)胞肺癌患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)的臨床意義.pdf

1、背景：
　　 目前肺癌已成為全世界最常見(jiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率已居世界首位。小細(xì)胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)占原發(fā)性支氣管肺癌的10％～25％，由于SCLC具有高侵襲性、高復(fù)發(fā)性及生長(zhǎng)迅速、血行轉(zhuǎn)移發(fā)生早且預(yù)后不良的特點(diǎn)，因此對(duì)SCLC的早期診斷可改善SCLC的預(yù)后。目前SCLC的診斷及對(duì)化療藥物療效預(yù)測(cè)主要依靠組織病理學(xué)及影像學(xué)檢查，而對(duì)于微轉(zhuǎn)移病灶影像學(xué)很難做出判斷，其準(zhǔn)確性及可操作

2、性受到諸多限制。循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumorcell，CTC)作為潛在的生物標(biāo)志物及研究惡性腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程的一種重要參數(shù)，在最近的癌癥研究方面較為引人注目。CTC檢測(cè)立足于SCLC具有轉(zhuǎn)移傾向這一生物學(xué)特性，在SCLC的早期診斷、分期，預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，建立個(gè)體化治療方案具有重要意義。CTC在腫瘤的轉(zhuǎn)移過(guò)程中居于重要地位，但因在外周血中的數(shù)量稀少，缺乏特異性高的腫瘤標(biāo)記物，常規(guī)的細(xì)胞學(xué)方法難以檢測(cè)，使其在臨床上的應(yīng)用受到

3、限制。伴隨現(xiàn)代檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用，CTC檢測(cè)方法的敏感性和特異性不斷提高，其臨床應(yīng)用價(jià)值逐漸得到人們的重視。
　　 目的：
　　 本研究以胃泌素釋放肽前體mRNA作為小細(xì)胞肺癌(small cell lung cancer， SCLC)患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cell，CTC)的標(biāo)志，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR方法檢測(cè)，分析CTC水平與臨床病理因素、近期療效及預(yù)后的相關(guān)性，同時(shí)與血

4、清ProGRP、NSE進(jìn)行比較。
　　 方法：
　　 收集山東省腫瘤醫(yī)院內(nèi)科自2012年4月-2012年9月收治的初治SCLC患者61例，分別于第1次化療前和第3次化療前抽取外周靜脈血，用QIAamp RNABlood Mini Kit提取總RNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)外周血中以胃泌素釋放肽前體(pro-gastrin-releasing peptide，ProGRP)mRNA為標(biāo)記

5、的CTC數(shù)目;另收集血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法和電化學(xué)發(fā)光法，檢測(cè)患者血清proGRP和NSE的濃度。療效評(píng)價(jià)按照2009年美國(guó)國(guó)立癌癥研究所實(shí)體瘤客觀療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)修訂版RECIST1.1進(jìn)行評(píng)價(jià)。采用SPSS17.0計(jì)算機(jī)醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，全部檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。統(tǒng)計(jì)圖表的繪制采用SPSS17.0和Excel2003。
　　 結(jié)果：
　　 1.治療前外周血ProGRP mRNA表

6、達(dá)水平與性別、年齡無(wú)明顯相關(guān)性（P＞0.05），而與原發(fā)腫瘤大小、臨床分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05）。
　　 2.治療后化療有效組ProGRP mRNA表達(dá)水平下降，穩(wěn)定或進(jìn)展組ProGRPmRNA表達(dá)水平不變或升高。
　　 3.化療前后ProGRP mRNA表達(dá)水平變化與影像學(xué)療效評(píng)價(jià)顯著相關(guān)(r=0.671，p＜0.001)。
　　 4.血清ProGRP和NSE濃度與腫瘤大小、臨床分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)(P＜

7、0.05），與性別、年齡無(wú)關(guān)（P＞0.05）。
　　 5.治療后有效組血清ProGRP和NSE都顯著降低（P＜0.05），而穩(wěn)定和進(jìn)展組血清ProGRP和NSE均無(wú)明顯變化(P＞0.05);ProGRP的變化幅度較NSE明顯(P＜0.05）;病情進(jìn)展的患者血清ProGRP明顯高于治療前(P＜0.05)，而NSE雖升高但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　 6.外周血ProGRP mRNA表達(dá)水平與血清ProGRP、N

8、SE含量呈正相關(guān)(R2ProGRP=0.34，R2SE=0.20，P＜0.05)。血清ProGRP與NSE呈正相關(guān)(R2=0.47，P＜0.001)。
　　 結(jié)論：
　　 1.ProGRP mRNA可以作為RT-PCR法檢測(cè)SCLC患者外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞的標(biāo)志物。
　　 2.SCLC患者外周血中檢測(cè)出ProGRP mRNA表達(dá)提示可能有血循環(huán)轉(zhuǎn)移。
　　 3.ProGRP mRNA表達(dá)與SCLC患者轉(zhuǎn)移密