纖維環(huán)和終板損傷致自免疫椎間盤炎動物模型的影像學及免疫學研究.pdf

1、目的：通過手術破壞纖維環(huán)和軟骨終板建立自免疫椎間盤炎的動物模型，重點探討其病變過程中的影像學變化及免疫學表達，深入探討自免疫因素在椎間盤炎中的作用，使動物模型更具有實際應用價值，進而為臨床診斷和治療的創(chuàng)新提供理論基礎。 方法：選擇健康成年新西蘭大耳白兔50只，雌雄不限，隨機分為三組：手術組(30只)，經前外側入路手術破壞腰椎間盤纖維環(huán)及上位軟骨終板，建立兔椎間盤炎動物模型；設立假手術組(10只)及對照組(10只)。對照組即刻行X

2、線及MRI檢查，處死取腰3/4、腰4/5、腰5/6椎間盤標本。假手術組同手術組取相同手術入路，暴露椎間盤但不破壞纖維環(huán)和軟骨終板。手術組與假手術組分別于術后1周、2周、4周、8周、12周分批處死動物，處死取材前行X線片、MRI檢查。取手術區(qū)椎間盤標本，行：(1)大體病理切片，觀察椎間盤及椎體炎癥變化；(2)常規(guī)HE染色，形態(tài)學比較及淋巴細胞的表達；(3)應用免疫組化技術和免疫熒光技術觀察標本CD4陽性、CD8陽性T淋巴細胞，免疫球蛋白I

3、gG、IgM的表達。手術組與假手術組、對照組進行比較以分析各指標的表達及變化過程，探討自免疫反應在椎間盤炎中的作用；(4)細菌學培養(yǎng)。 結果：1.影像學表現：手術組常規(guī)X線檢查在術后1周未見異常征象，術后2周顯示手術區(qū)椎間隙狹窄，術后4周手術椎體骨質疏松透過度增加，術后8周上位椎體密度不均勻，變化累及下位椎體，術后12周可見變化累及整個上位椎體，骨質增生、破壞同時存在。手術組動物術后2周MRI出現上位椎體終板及終板下骨的炎性表現

4、，矢狀位T2WI上即可見手術椎間盤信號異常，呈不同程度的破壞、碎裂、變小，正常髓核的高信號消失，呈低信號改變。終板及終板下椎體松質骨有不同程度的侵犯破壞致椎體和椎間盤分界模糊不清，相鄰椎體受累，T2WI上呈混雜斑點狀高信號。術后4周MRI顯示椎間盤信號改變進一步加重，并且手術區(qū)下位椎體的終板及終板下骨出現信號改變，術后12周T2WI上可見手術椎間盤相鄰上位整個椎體高信號。假手術組與對照組均未見異常。2.大體病理：三節(jié)段椎體矢狀位切片并常

5、規(guī)染色顯示手術區(qū)椎間盤、終板及終板下骨炎性改變，淋巴細胞浸潤。3.HE染色：光鏡下可見手術組椎間盤內、外層纖維環(huán)紊亂，失去正常結構，膠原纖維不連續(xù)、增生，外層纖維環(huán)成纖維細胞增多，術后1-4周可見淋巴細胞浸潤，近纖維環(huán)內層髓核部分有大量軟骨細胞增生。假手術組及對照組則無上述表現。4.免疫組化染色：手術組1周、2周、4周的標本可見近邊緣細胞浸潤區(qū)有CD4陽性、CD8陽性淋巴細胞分布，其中CD4陽性淋巴細胞主要在術后1周、2周取材的標本表達

6、較多，CD8陽性淋巴細胞則在術后2周、4周取材的標本表達較多。而假手術組則于術后1周、2周可見有極少量淋巴細胞表達，對照組未見淋巴細胞表達。手術組淋巴細胞表達與假手術組、對照組比較具有統(tǒng)計學意義。5.免疫熒光：手術組可見手術椎間盤近邊緣區(qū)免疫球蛋白IgG、IgM呈陽性反應，于1周少量表達，術后2周、4周、8周大量表達。假手術組及對照組均可見IgG極少量表達，未見IgM表達。手術組與假手術組、對照組比較具有統(tǒng)計學意義。6.細菌培養(yǎng)：陰性。