體外抑制幽門(mén)螺桿菌的人源乳酸桿菌的選育.pdf

1、[目的]幽門(mén)螺桿菌(Helicobacterpylori，Hp)作為慢性胃炎、消化性潰瘍甚至胃癌的主要致病因素，至今仍沒(méi)有理想的根治方法。微生態(tài)療法從一個(gè)嶄新的角度擬解決傳統(tǒng)療法存在的各種問(wèn)題，而且微生態(tài)調(diào)節(jié)劑的作用不僅僅在于抗感染，還能調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫機(jī)能，改善胃腸道微生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)健康。本課題在國(guó)內(nèi)外疫苗發(fā)展和乳酸桿菌防治幽門(mén)螺桿菌(Hp)成功經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，直接從胃腸道標(biāo)本中篩選出具有良好抑制或殺滅幽門(mén)螺桿菌且具有高度胃粘膜粘附能力的

2、乳酸桿菌，并進(jìn)行鑒定。為開(kāi)發(fā)優(yōu)良的抑制幽門(mén)螺桿菌的微生態(tài)制劑及相關(guān)的保健食品，提供良好的乳酸桿菌菌種；為研究和發(fā)展Hp基因工程生物活菌疫苗提供良好的載體釋放系統(tǒng)。同時(shí)初步探討乳酸桿菌抑制Hp粘附胃粘膜的機(jī)理。 [方法] 1、乳酸桿菌的分離與初步鑒定：采集臨床胃病患者胃粘膜組織的活檢標(biāo)本和胃液標(biāo)本，以及正常人糞便標(biāo)本，采用選擇性培養(yǎng)基分離可疑乳酸桿菌并進(jìn)行初步鑒定。 2、篩選具有良好抑制或殺滅幽門(mén)螺桿菌并具有較強(qiáng)胃

3、粘膜粘附能力的乳酸桿菌：2.1采用打孔法篩選對(duì)Hp抑菌力強(qiáng)的乳酸桿菌菌株。 3、乳酸桿菌抑制Hp粘附胃粘膜機(jī)理的初步探討：通過(guò)幽門(mén)螺桿菌標(biāo)準(zhǔn)株SS1粘附胃粘膜上皮細(xì)胞SGC7901的細(xì)胞模型，利用間接熒光抗體試驗(yàn)，建立乳酸桿菌對(duì)Hp粘附SGC7901細(xì)胞的抑制試驗(yàn)，并檢測(cè)乳酸桿菌活菌和滅活菌株對(duì)Hp標(biāo)準(zhǔn)株SS1粘附能力的抑制作用。@24、對(duì)篩選菌株的最終鑒定：根據(jù)細(xì)菌菌落形態(tài)、生化反應(yīng)，應(yīng)用API50CHL乳酸桿菌系統(tǒng)生化鑒定卡

4、鑒定細(xì)菌到種。 [結(jié)論]1、篩選出四株具有良好抑制幽門(mén)螺桿菌并具有一定胃粘膜粘附能力的，一定耐酸耐膽鹽能力的乳酸桿菌。 2、乳酸桿菌的活菌及其滅活菌株均具有良好的抑制Hp粘附SGC7901細(xì)胞的能力，活菌與滅活菌對(duì)Hp粘附SGC7901細(xì)胞的抑制能力無(wú)顯著性差別。 3、建立了乳酸桿菌抑制Hp粘附SGC7901細(xì)胞的試驗(yàn)方法。所查中文文獻(xiàn)中未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。 4、經(jīng)鑒定，篩選出的四株菌3株為唾液乳桿菌，1株為植