白頭翁皂苷脂質(zhì)體的制備及其對溶血作用的影響.pdf

1、目的：通過制備白頭翁皂苷HDG-B3脂質(zhì)體凍干粉，達到改善白頭翁皂苷的溶血性的目的。
　　方法：首先建立了白頭翁皂苷HDG-B3的高效液相分析方法，并對方法學(xué)中的精密度、回收率等進行了考察。同時考察了白頭翁皂苷的理化性質(zhì)，包括白頭翁皂苷在pH7.4的磷酸鹽緩沖液中的穩(wěn)定性，油水分配系數(shù)，在強酸強堿強氧化條件下的穩(wěn)定性，白頭翁皂苷的體外溶血性。其次采用薄膜分散法，制備了白頭翁皂苷脂質(zhì)體，采用微柱離心法測定脂質(zhì)體包封率和載藥量；通過單

2、因素法考察磷脂種類、水化溫度、磷脂濃度、膽固醇濃度及孵育時間對脂質(zhì)體的包封率和體外溶血率的影響；以產(chǎn)品外觀、復(fù)溶性和粒徑為考察指標(biāo)，篩選凍干保護劑。最后對白頭翁脂質(zhì)體的安全性進行了評價，包括小鼠急性毒性實驗和體內(nèi)溶血性試驗。
　　結(jié)果：
　?。?）建立的白頭翁皂苷的高效液相測定方法線性關(guān)系良好，日內(nèi)日間精密度、回收率、穩(wěn)定性均符合要求。理化性質(zhì)研究表明，白頭翁皂苷在pH7.4的磷酸鹽緩沖液中較為穩(wěn)定，可用此溶液作為脂質(zhì)體水化

3、的介質(zhì)；白頭翁皂苷在強酸、強堿、強氧化條件下不穩(wěn)定，易降解。體外溶血試驗表明，白頭翁皂苷體外溶血性極強，HR5和HR50分別為0.20μg2mL-1和0.51μg2mL-1。
　?。?）采用微柱離心法可將脂質(zhì)體與游離藥物完全分離，藥物回收率高。制得的脂質(zhì)體包封率為（80.60±0.37）%，粒徑和Zeta電位分別為98.1nm和-26.56mV。當(dāng)磷脂濃度為4mg2mL-1，藥脂比為1:15，膽固醇濃度為1.6mg2mL-1，45

4、℃孵育0.5h時，制得的脂質(zhì)體體外溶血率較低，可使藥物HR5由0.2μg2mL-1提高至8.4μg2mL-1。同時，對凍干保護劑進行篩選，確定采用8%蔗糖作為保護劑時，脂質(zhì)體凍干粉復(fù)溶效果好。
　?。?）最后本研究對白頭翁脂質(zhì)體的安全性進行了評價。小鼠急性毒性實驗表明，脂質(zhì)體可明顯延長小鼠的存活時間，但LD50沒有顯著性提高，這可能與藥物的毒性過大有關(guān)；從HE染色的組織切片中可以看出，原料藥組肝、肺、心臟血管有不同程度的溶血現(xiàn)象，