膽固醇流出對ox-LDL誘導的巨噬細胞凋亡的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究膽固醇流出對ox-LDL誘導的巨噬細胞凋亡的影響。 方法：用50mg/Lox-LDL與RAW264.7細胞共同孵育0，12，24，48，96小時。用50mg/Lox-LDL處理RAW264.7細胞48小時后加入不同濃度的HDL3(50，100，200mg/L)和膽固醇流出抑制劑Brefeldin(BFA)或膽固醇流出促進劑β-cyclodextrin(β-CD)孵育24小時。油紅O染色觀察細胞內脂滴的形成情況；高效液相

2、分析法檢測細胞內膽固醇含量；液體閃爍計數(shù)器檢測細胞內膽固醇流出；Hoechst33258觀察細胞凋亡形態(tài)；流式細胞儀檢測細胞凋亡。 結果：用50mg/Lox-LDL與RAW264.7細胞共同孵育0，12，24，48，96小時，結果顯示：RAW264.7細胞的凋亡率隨著處理時間的延長而顯著提高。在50mg/Lox-LDL與RAW264.7細胞共同孵育48小時出現(xiàn)明顯的凋亡形態(tài)學改變(胞質體積縮小，胞核凝集、邊緣化)，油紅O染色顯示

3、，細胞內的大量脂滴形成，細胞膽固醇酯含量顯著增加，細胞呈典型泡沫化形態(tài)。用50mg/Lox-LDL處理RAW264.7細胞48小時后，加入不同濃度的HDL3(50，100，200mg/L)和膽固醇流出抑制劑BFA(4μmol)或β-CD(10mmol/L)孵育24小時。 結果顯示：HDL3呈濃度依賴性的促進細胞內膽固醇流出和降低細胞內的膽固醇含量，油紅O染色顯示，細胞內的脂滴明顯減少。細胞的凋亡率也隨著HDL3濃度的升高而逐漸降低，細胞

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