人腫瘤壞死因子α聯合溴隱亭逆轉肝細胞肝癌多藥耐藥性體內外實驗研究.pdf

1、肝癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)是人體最常見的惡性腫瘤之一。以手術為主的個體化綜合治療已成為目前肝癌治療的規(guī)范化治療方案?；熥鳛楦伟┮豁椫匾妮o助治療手段在臨床仍占據重要的地位，但多藥耐藥現象的產生卻是制約著化療效果的重要因素之一。 近年來，尋找更加有效的基因治療手段和高效、低毒的藥物治療肝癌的耐藥問題仍是學者們研究的熱點課題之一。因為任何單一的手段逆轉肝癌的多藥耐藥現象面對復雜的耐藥機制均不能達

2、到理想的治療效果，聯合兩種有效的方法更有可能達到顯著增強化療藥物毒效的目的。研究發(fā)現利用基因工程技術將細胞因子基因轉染腫瘤細胞，可克服其全身應用的副反應，且細胞因子釋放到腫瘤周圍可增加其刺激機體免疫機能的抗腫瘤作用，并且可改變腫瘤細胞對其它治療方法如化療的敏感性。人腫瘤壞死因子(hTNF-α)是迄今為止所發(fā)現的抗腫瘤活性最強的細胞因子之一。另有學者發(fā)現溴隱亭有抑制ATP酶的活性從而抑制P-gp的藥物外泵功能。溴隱亭是一種D2多巴胺受體拮

3、抗劑，臨床上主要用于治療巴金森氏綜合征和肢端肥大癥，由于其毒副作用少而易于被患者接受。本實驗即是聯合人腫瘤壞死因子(hTNF-α)和溴隱亭對肝癌耐藥性的治療進行了系統的體內外實驗研究，共分以下四部分。 第一部分真核表達載體pBK-hTNFα的構建及其在人肝癌耐藥細胞株HepG2/ADM中的穩(wěn)定表達 目的：構建可在真核細胞內表達人腫瘤壞死因子alpha(hTNF-α)基因的真核表達載體。經脂質體轉染人肝癌耐藥細胞株HepG

4、2/ADM，建立穩(wěn)定表達hTNF-α基因的細胞模型，為基因治療奠定基礎。 結論：通過DNA重組技術成功地構建了可在體外穩(wěn)定表達hTNF-αcDNA全長的真核表達載體pBK-hTNFα。 第二部分人腫瘤壞死因子α聯合溴隱亭對肝癌耐藥細胞株化療敏感性的研究 目的：研究溴隱亭(Bromocriptine，BCT)聯合人TNF-α基因(humantumornecrosisfactor-α，hTNFα)處理人肝癌耐藥細胞株

5、HepG2/ADM對化療敏感性的影響。 結論：溴隱亭和hTNFα通過不同的機制逆轉腫瘤的多藥耐藥性，兩者聯合明顯加強抗腫瘤藥物對細胞的毒力。 第三部分B超引導下裸鼠原位肝細胞癌多藥耐藥模型的建立 目的：B超引導下建立裸鼠原位肝癌多藥耐藥模型。 結論：成功在B超引導下建立肝癌多藥耐藥動物模型為研究肝癌多藥耐藥逆轉提供動物平臺。 第四部分人腫瘤壞死因子-α聯合溴隱亭對人肝癌裸鼠耐藥模型耐藥性逆轉的研