鵝盲腸產纖維素酶細菌的分離鑒定及酶學性質研究.pdf

1、纖維素作為世界上最豐富的有機物質，然而其資源并沒有得到充分的開發(fā)利用，甚至有很大一部分纖維素變成環(huán)境污染物。關于有纖維素分解能力的微生物研究報道很多，這些微生物大部分是從植物殘體及土壤中分離的。從動物腸道內分離纖維素分解菌的研究很多，但多是從反芻動物瘤胃中分離得到的。目前，關于鵝盲腸分解纖維素的細菌的研究很少。作為草食動物的鵝，其對纖維素類物質有很強的消化能力。因鵝的盲腸中棲息著很多微生物，所以部分學者認為鵝盲腸和反芻動物瘤胃一樣具有發(fā)

2、酵功能。為了充分利用纖維素，本實驗對鵝盲腸纖維素分解菌進行了分離鑒定，并優(yōu)化其發(fā)酵產酶的條件，研究酶的性質，為該菌的應用及研究奠定一定的基礎。
　　本試驗隨機選6只揚州白鵝，公母各一半。饑餓處理24 h，處死，取其盲腸，從其內容物中分離出一株有纖維素分解能力的細菌，通過DNS法測定其發(fā)酵培養(yǎng)上清液酶活力值為1.25 U*mL-1。通過形態(tài)學和16SrDNA鑒定，并做系統(tǒng)進化樹，發(fā)現該菌株與解淀粉芽孢桿菌親緣關系最近，命名為 Bac

3、illus amyloliquefaciens S1。
　　通過單因素和正交試驗，對B. amyloliquefaciens S1產纖維素酶條件進行優(yōu)化，得到其最適發(fā)酵條件：發(fā)酵溫度為37℃、發(fā)酵時間為72 h、發(fā)酵培養(yǎng)基起始pH為6.0、裝液量為75 mL/250 mL；各因素對B. amyloliquefaciens S1產酶能力影響的大小順序依次為：pH值>培養(yǎng)時間=培養(yǎng)溫度>裝液量。
　　研究B. amyloliqu

4、efaciens S1纖維素酶的酶學性質，結果顯示，該菌所產纖維素酶的最適催化反應溫度為60℃，pH為7，該酶耐熱，耐酸堿，對纖維素類物質的分解作用較廣泛。Fe3+對該纖維素酶活力有一定的抑制作用，而K+、Cu2+、Fe2+、Mn2+和Zn2+對酶活力都有顯著的促進作用。
　　試驗克隆得到B. amyloliquefaciens S1的一種纖維素酶基因，該基因ORF片段大小為1500 bp，編碼499個氨基酸，該序列在Genban