胃癌中HIF-1α、Twist的表達(dá)與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系及意義.pdf

1、本文從以下幾個(gè)部分展開論述:
　　第一部分
　　目的:分析Hif-1α、Twist在胃癌中的表達(dá)與胃癌臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系,探討兩者在判斷患者預(yù)后中的意義,并且分析兩種蛋白的表達(dá)在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象中的作用。
　　方法:采用免疫組織化學(xué)SABC法檢測120例胃癌標(biāo)本及其對應(yīng)癌旁組織中Hif-1α、Twist、E-cad、N-cad的表達(dá)情況,分析Hif-1α、Twist表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)、術(shù)后生存時(shí)間之間的關(guān)系;探

2、討兩種蛋白的表達(dá)與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的關(guān)系;
　　結(jié)果:在胃癌組織中Hif-1α、Twist、N-cad、E-cad的陽性率分別為61.7％、59.1%、46.7%、37.5%,癌旁組織中的陽性率分別為22.5%、18.3%、10.8%、91.7%。腫瘤組織中的表達(dá)與癌旁組織相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。Twist的表達(dá)與腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及浸潤深度明顯相關(guān)(p<0.05)。Hif-1α的表達(dá)與腫瘤的分化類型、浸潤深

3、度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈明顯相關(guān)性。Twist和(或)Hif-1α陽性表達(dá)的患者其五年生存率明顯低于其陰性表達(dá)的患者。Twist、Hif-1α的表達(dá)與E-cad的低表達(dá)和N-cad的反常性高表達(dá)存在密切相關(guān)性。
　　結(jié)論:胃腺癌組織中Hif-1α、Twist表達(dá)與腫瘤的生物學(xué)行為密切相關(guān),Hif-1α、Twist的檢測對預(yù)測腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移、判斷預(yù)后具有一定價(jià)值。Hif-1α蛋白可能通過上調(diào)Twist表達(dá),促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的發(fā)生,進(jìn)而促進(jìn)

4、胃腺癌的浸潤、轉(zhuǎn)移。
　　第二部分
　　目的:觀察RNA干擾HIF-1α表達(dá)對胃癌BGC-823細(xì)胞株上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的影響,初步探討HIF-1α在胃癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象中的作用及其臨床應(yīng)用價(jià)值。
　　方法:設(shè)計(jì)合成人HIF-1α干擾片段,構(gòu)建其表達(dá)載體psilencer3.1-HIF-1α重組質(zhì)粒,并將其瞬時(shí)導(dǎo)入人低分化胃腺癌細(xì)胞株BCG-823細(xì)胞中,采用RT-PCR檢測HIF-1α mRNA的表達(dá),細(xì)胞免疫熒光檢測

5、TWIST、 E-cad、N-cad蛋白的表達(dá),Transwell小室檢測細(xì)胞侵襲能力的改變。采用CoCl2誘導(dǎo)細(xì)胞缺氧作為陽性對照組,同時(shí)設(shè)置空白對照組和空質(zhì)粒組。
　　結(jié)果:瞬時(shí)轉(zhuǎn)染psilencer3.1-HIF-1α重組質(zhì)粒后,BGC-823細(xì)胞HIF-1α表達(dá)在mRNA及蛋白水平均受到明顯抑制,Twsit、N-cad蛋白表達(dá)較CoCl2組降低;干擾組細(xì)胞體外侵襲遷移能力受到明顯抑制(p<0.05)。
　　結(jié)論:構(gòu)建