益氣活血法對(duì)腦出血大鼠血腫周?chē)?xì)胞外基質(zhì)表達(dá)的影響.pdf

1、目的:腦出血(intracerebralhemorrhage，ICH)是腦血管病中的危重類(lèi)型，以其高發(fā)病率，嚴(yán)重的致死率和致殘率而受到人們?cè)絹?lái)越多的關(guān)注，屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)的“中風(fēng)”范疇。但是目前除了外科手術(shù)清除血腫和脫水降顱內(nèi)壓外，尚無(wú)其它有效的治療方法。自清代著名醫(yī)家王清任創(chuàng)立益氣活血名方補(bǔ)陽(yáng)還五湯以來(lái)，益氣活血法在臨床上治療中風(fēng)得到廣泛的應(yīng)用。細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellularmatrix，ECM)主要是由膠原(collagens)

2、、連接糖蛋白（包括Laminin，F(xiàn)ibronectin）等不溶結(jié)構(gòu)成分混合而成的組織特異性三維結(jié)構(gòu)，在腦出血后微血管系統(tǒng)重建過(guò)程中ECM與血管新生(angiogenesis)相互作用，即血管新生可以導(dǎo)致ECM成分的降解、重塑，而ECM對(duì)新生血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移、存活和新生血管成型、成熟作用重要。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)用Ⅶ型膠原酶誘導(dǎo)大鼠腦出血，選益氣活血法代表方補(bǔ)陽(yáng)還五湯全方及其益氣組分、活血組分拆方干預(yù)，觀察腦出血大鼠腦損傷區(qū)組織細(xì)胞外基質(zhì)成

3、分Ⅳ型膠原(Collagen-Ⅳ，C-Ⅳ)、纖維連接蛋白(Fibronectin，F(xiàn)N)、層粘連蛋白-1(Liminin-1，LN-1)以及層粘連蛋白-5(Liminin-5，LN-5)表達(dá)的變化，探討益氣活血法治療腦出血的作用機(jī)制。
　　 方法:150只Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組、模型組、益氣組、活血組和益氣活血組。立體定位向腦內(nèi)蒼白球注入含0.5UⅦ型膠原酶的滅菌生理鹽水2.5μL復(fù)制腦出

4、血模型。益氣組、活血組與益氣活血組分別予補(bǔ)陽(yáng)還五湯益氣組分、補(bǔ)陽(yáng)還五湯活血組分及補(bǔ)陽(yáng)還五湯全方灌胃。假手術(shù)組和模型組大鼠灌服等體積蒸餾水。分別于造模術(shù)后并灌胃3d、7d、14d、21d、28d五個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)抽取6只大鼠深麻醉后迅速剝離顱骨，并分離鼠腦取得血腫區(qū)腦組織，采用免疫組化方法觀察各組3、7、14、21、28天血腫周?chē)?xì)胞外基質(zhì)成分C-Ⅳ、FN、LN-1以及LN-5表達(dá)的空間位置變化，其結(jié)果進(jìn)行平均光密度掃描半定量分析。
　

5、　 結(jié)果:假手術(shù)組在不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞外基質(zhì)成分均未見(jiàn)明顯表達(dá)。模型組C-Ⅳ在3天時(shí)即在血腫周?chē)磉_(dá)，21天達(dá)到高峰，于28天開(kāi)始下降，益氣活血組表達(dá)高峰持續(xù)至21天，并在多個(gè)時(shí)點(diǎn)表達(dá)明顯高于同時(shí)點(diǎn)模型組。FN在3天時(shí)即在血腫周?chē)磉_(dá)，7-21天時(shí)持續(xù)表達(dá)增加，高峰在21天達(dá)到，28天時(shí)表達(dá)顯著下降，益氣活血組在3-28天時(shí)均高于同時(shí)點(diǎn)模型組。LN-1在3天時(shí)血腫周?chē)鷧^(qū)域即有表達(dá)，7天時(shí)表達(dá)增高，21天達(dá)到高峰，28天表達(dá)下降，益氣活血組

6、在3-28天表達(dá)高于同時(shí)點(diǎn)模型組。LN-5陽(yáng)性表達(dá)在3天時(shí)即出現(xiàn)，21天時(shí)表達(dá)增高達(dá)到高峰，并在28天時(shí)出現(xiàn)下降，益氣活血組在3-28天時(shí)表達(dá)高于同時(shí)點(diǎn)模型組。
　　 結(jié)論:1.腦出血后血腫周?chē)?xì)胞外基質(zhì)中C-Ⅳ、FN、LN-1以及LN-5表達(dá)增強(qiáng)，可能參與腦出血后病灶組織血管新生;2.益氣活血法能夠能促進(jìn)C-Ⅳ、FN、LN-1以及LN-5的表達(dá)，顯著改善腦出血后血腫區(qū)的血管新生情況，有利于腦出血損傷區(qū)的微血管系統(tǒng)重建，從而實(shí)現(xiàn)