日本血吸蟲期別、性別差異表達(dá)蛋白質(zhì)組研究.pdf

1、血吸蟲病是一種危害嚴(yán)重的人獸共患寄生蟲病，血吸蟲生活史復(fù)雜，與終宿主有關(guān)的蟲體有尾蚴、童蟲、成蟲、蟲卵階段，從尾蚴侵入到雌蟲成熟產(chǎn)卵在體內(nèi)經(jīng)歷了復(fù)雜的移行，發(fā)育過程。不同蟲體在形態(tài)學(xué)和生物學(xué)上的變化也伴隨著不同的蛋白差異表達(dá)，導(dǎo)致血吸蟲獨(dú)特的代謝和發(fā)育過程。 本實(shí)驗(yàn)收集日本血吸蟲尾蚴、8天和19天童蟲、42天雄蟲、雌蟲和蟲卵，分別抽提可溶性及疏水性蛋白，建立24cm、pH3-11的高重復(fù)性銀染及考染雙向電泳圖譜，利用Imagem

2、aster2D軟件對電泳圖譜分析表明，在尾蚴、8天童蟲、19天童蟲、雄蟲、雌蟲、蟲卵中分別檢測到可溶性蛋白斑點(diǎn)928±61、1465±41、1230±30、904±34、1080±26、1476±52個；疏水性蛋白斑點(diǎn)845±53、986±22、1145±35、1066±39、1123±45、1337±44個。圖譜比對顯示童蟲、雌雄成蟲蛋白之間圖譜相似性較高，其中8天與19天童蟲蛋白圖譜相似性最高，尾蚴、蟲卵與童蟲和成蟲蛋白相似性較低。

3、 在圖譜分析的基礎(chǔ)上用電噴霧線性離子阱質(zhì)譜(LTQ)或基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜(MALDI-TOF/TOFMS)對95個表達(dá)穩(wěn)定的差異、特異以及共有可溶性蛋白進(jìn)行鑒定，成功獲得了84個蛋白斑點(diǎn)的肽指紋圖譜及肽序列檢測數(shù)據(jù)，這些蛋白包括8天童蟲蛋白29個、19天童蟲蛋白16個、雄蟲蛋白18個、雌蟲蛋白12個、蟲卵蛋白9個，分屬75種蛋白，其中60種有功能相關(guān)信息，數(shù)據(jù)庫檢索結(jié)果表明這些蛋白主要與細(xì)胞運(yùn)動，蛋白折迭、修飾