舍曲林抗新生隱球菌的體外及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景和目的：
　　 新生隱球菌是一種嚴(yán)重危害人類健康的醫(yī)學(xué)致病真菌，它不僅侵犯免疫缺陷患者，也經(jīng)常感染正常人群。近年來，由于免疫抑制劑、皮質(zhì)類固醇激素、抗生素的廣泛應(yīng)用、器官移植、靜脈插管和體內(nèi)植入人工物等侵襲性診療技術(shù)的廣泛應(yīng)用以及艾滋病患者的增多，隱球菌的感染率不斷增高。目前臨床上常用的治療隱球菌性腦膜炎的抗真菌藥物主要有以下幾種：氟康唑、氟胞嘧啶、兩性霉素B和兩性霉素B脂質(zhì)體等。這些抗真菌藥物的作用機(jī)制不盡相同，雖然都

2、已廣泛應(yīng)用于臨床，但仍各有優(yōu)缺點(diǎn)，大部分藥物在腦脊液中的濃度偏低，所以隱球菌腦膜炎的治療仍然存在著挑戰(zhàn)，需要發(fā)現(xiàn)更新更好更成熟的抗隱球菌的藥物。
　　 舍曲林是最強(qiáng)的選擇性5-羥色胺攝取抑制劑之一，主要用于各種抑郁癥及強(qiáng)迫癥的治療，是目前廣泛使用的治療嚴(yán)重月經(jīng)前期綜合癥的一線用藥。2001年奧地利學(xué)者Lass-FloerlC通過臨床病例首次發(fā)現(xiàn)了舍曲林具有抗白念珠菌的作用，3位同時(shí)患有月經(jīng)前期焦慮障礙和復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病的患

3、者接受了舍曲林的治療后，復(fù)發(fā)性陰道念珠菌病沒有再次發(fā)生。同時(shí)該研究小組對(duì)念株菌屬的不同種及曲霉屬的不同種進(jìn)行了體外藥敏實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明舍曲林有快速的抗真菌作用。2003年該研究小組又報(bào)道推測(cè)舍曲林可以降低白念珠菌等真菌病原體在體內(nèi)的毒性。之后又有相關(guān)研究表明，舍曲林和伊曲康唑或兩性霉素B的聯(lián)合用藥可以對(duì)某些曲霉起到協(xié)同作用。但是舍曲林對(duì)新生隱球菌的作用目前還沒有相關(guān)的研究報(bào)道，美國(guó)德克薩斯A&M大學(xué)生物系的林曉蓉學(xué)者在實(shí)驗(yàn)室中檢測(cè)到新生隱

4、球菌grubii變種比白念珠菌屬對(duì)舍曲林更為敏感，因此我們?cè)诤献鞯幕A(chǔ)上進(jìn)行了舍曲林對(duì)新生隱球菌不同血清型和莢膜缺陷株的藥物敏感性的檢測(cè)，來進(jìn)一步檢測(cè)不同濃度的舍曲林對(duì)不同血清型新生隱球菌的生長(zhǎng)抑制作用。并通過構(gòu)建新生隱球菌感染小鼠的動(dòng)物模型，對(duì)舍曲林體內(nèi)抗新生隱球菌的作用進(jìn)行了進(jìn)一步的研究和探討。
　　 方法：
　　 通過體外不同濃度舍曲林藥物溶液與新生隱球菌菌懸液共同培養(yǎng)的方法，比較不同時(shí)間點(diǎn)，舍曲林對(duì)新生隱球菌的生

5、長(zhǎng)抑制作用，以及舍曲林對(duì)新生隱球菌不同血清型和莢膜缺陷株的作用。通過BABL/c小鼠尾靜脈注射新生隱球菌菌懸液的方法構(gòu)建隱球菌性腦膜炎小鼠的動(dòng)物感染模型，探討舍曲林對(duì)隱球菌性腦膜炎小鼠是否有治療作用，并且通過舍曲林與氟康唑聯(lián)合應(yīng)用，探討兩者藥物之間是否有協(xié)同作用。
　　 結(jié)果：
　　 4h、6h、8h時(shí)舍曲林對(duì)新生隱球菌體外生長(zhǎng)的抑制作用與RPMI培養(yǎng)基生長(zhǎng)對(duì)照組比較，8μg/ml以下濃度的舍曲林對(duì)新生隱球菌的生長(zhǎng)抑制率

6、差異不明顯；在8μg/ml～64μg/ml濃度時(shí)，舍曲林對(duì)新生隱球菌的生長(zhǎng)抑制作用與生長(zhǎng)對(duì)照組比較有差異(P＜0.05)，而且隨著舍曲林藥物濃度的升高，這種抑制作用更加明顯，且這種抑制作用有濃度依賴性；當(dāng)舍曲林濃度達(dá)到32μg/ml以上時(shí)，隱球菌在舍曲林的作用下，菌懸液的濃度低于原先濃度，提示此濃度的舍曲林對(duì)新生隱球菌不僅具有生長(zhǎng)抑制作用，而且有一定的殺滅作用。在比較舍曲林對(duì)新生隱球菌A血清型、D血清型及莢膜缺陷株之間的作用時(shí)，發(fā)現(xiàn)舍曲

7、林對(duì)這三種菌株的生長(zhǎng)抑制作用沒有明顯的差異。
　　 予以灌胃處理10mg/kg或20mg/kg劑量的舍曲林都可明顯降低新生隱球菌模型小鼠第1天腦組織及肺組織的新生隱球菌真菌負(fù)荷量，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，低濃度舍曲林對(duì)感染小鼠腦組織的新生隱球菌負(fù)荷量的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，高濃度舍曲林對(duì)腦組織單獨(dú)真菌負(fù)荷量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，不同濃度的舍曲林都可有效的抑制肺組織新生隱球菌的真菌負(fù)荷量。腦組織及肺組織中，舍曲林治療對(duì)新生隱球菌

8、的抗菌效果均不如氟康唑，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。舍曲林與氟康唑聯(lián)合治療對(duì)新生隱球菌模型小鼠肺組織的抗菌效果強(qiáng)于單用舍曲林或氟康唑。
　　 結(jié)論：
　　 體外藥敏實(shí)驗(yàn)提示舍曲林有直接的抑制新生隱球菌生長(zhǎng)的作用，舍曲林的劑量越高，生長(zhǎng)抑制作用越明顯，而且可以表現(xiàn)為殺菌作用。體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)低劑量和高劑量的舍曲林都可明顯降低感染小鼠實(shí)驗(yàn)早期腦、肺組織的新生隱球菌負(fù)荷量，但在實(shí)驗(yàn)后期，低濃度的舍曲林對(duì)感染小鼠腦組織失去抑菌作用。腦、肺組