PTSD樣大鼠杏仁中央核核受體MR、GR表達(dá)變化的研究.pdf

1、目的：PTSD--創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD)是指由于災(zāi)害、戰(zhàn)爭(zhēng)、恐怖事件、交通意外、虐待等引起的巨大痛苦或受驚嚇、遭受悲劇導(dǎo)致的精神、身心癥狀的持續(xù)狀態(tài)或焦慮綜合征。隨著戰(zhàn)爭(zhēng)、社會(huì)暴力、重大交通事故和自然災(zāi)害等意外的增多，PTSD發(fā)生率也越來(lái)越高?，F(xiàn)今PTSD以其發(fā)病率高、病程長(zhǎng)、難以治愈等特點(diǎn)，嚴(yán)重影響人們身心健康而備受關(guān)注。 臨床研究發(fā)現(xiàn)，PTSD患者血中糖皮質(zhì)激素濃度(GC)異常低下。皮質(zhì)酮主要通過(guò)作用于MR(鹽皮質(zhì)激素受

2、體)和GR(糖皮質(zhì)激素受體)這兩種核受體發(fā)揮基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用。杏仁核是GC的靶點(diǎn)，杏仁中央核(CeA)和皮質(zhì)內(nèi)側(cè)核群(MeA)都有MR和GR的表達(dá)，MR的表達(dá)明顯弱于GR。MR和GR的存在提示CeA和MeA與能夠?qū)C的基礎(chǔ)和應(yīng)激水平進(jìn)行調(diào)節(jié)。這種調(diào)節(jié)作用與海馬及前額皮質(zhì)這些反饋抑制區(qū)的作用有實(shí)質(zhì)上的區(qū)別。目前認(rèn)為杏仁核上的GR對(duì)應(yīng)激調(diào)節(jié)發(fā)揮正反饋的作用。為此，研究PTSD樣大鼠CeA的MR和GR的變化，為進(jìn)一步揭示PTSD的發(fā)病機(jī)制提

3、供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)方法: 1、，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組成年健康雄性Wistar大鼠80只，體重150--180g(中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，實(shí)驗(yàn)室條件飼養(yǎng)，隨機(jī)分為四組，即無(wú)連續(xù)單一應(yīng)激(SPS)刺激的對(duì)照組及SPS刺激后靜養(yǎng)24h、7d和14d組，其中SPS刺激后7d組為PTSD樣大鼠組。 2、PTSD樣大鼠模型的建立采用2005年日本文部省召開(kāi)的國(guó)際PTSD科學(xué)會(huì)議確定的關(guān)于PTSD樣大鼠模型-SPS刺激后無(wú)干

4、擾喂養(yǎng)7天的方法。SPS刺激是指將大鼠連續(xù)進(jìn)行下述步驟處理：禁錮2h；強(qiáng)迫性游水20min(水深40cm，水溫25℃)；休息15分鐘后乙謎麻醉至意識(shí)喪失。 3、免疫組化SABC法檢測(cè)CeA的MR和GR的表達(dá)分別取正常及經(jīng)過(guò)SPS刺激后24h、7d、14d各組大鼠依次麻醉后灌流固定取腦，續(xù)固定后浸于Holt’s液至沉下。制作14μm厚冰凍切片，進(jìn)行MR、GR的免疫組化SABC法，然后光學(xué)顯微鏡(OLYMPUS，BX60，Japan

5、)下觀察、攝片，并做圖像分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 4、Western Blotting檢測(cè)CeA的MR和GR的表達(dá)分別取對(duì)照組及SPS刺激后24h、7d、14d各組大鼠的新鮮CeA組織，進(jìn)行Western Blotting檢測(cè)CeA的MR和GR的表達(dá)，并做圖像分析和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)論: 1、PTSD樣大鼠杏仁中央核核受體MR、GR表達(dá)變化及MR/GRLg值失衡，可能是致HPA軸調(diào)節(jié)紊亂，從而引發(fā)PTSD相關(guān)癥狀的重要因