苦瓜蛋白對新西蘭兔頸動脈球囊拉傷-套環(huán)后狹窄的影響.pdf

1、目的:
　　血管內膜的炎癥損傷和血管幾何形狀的改變都可以造成動脈管腔狹窄,但是兩種狹窄的形成機制可能是不相同的。本課題擬在動物身上復制出頸總動脈球囊損傷和頸總動脈套環(huán)這兩種經典的血管狹窄模型,以苦瓜蛋白進行干預,在動物水平上觀察苦瓜蛋白對血管狹窄的影響,并從炎性因子、平滑肌細胞增殖與調亡等方面初步探討其作用機制,為把苦瓜蛋白運用于血管再狹窄的預防和治療進行前期基礎研究。
　　方法:
　　1.動物實驗一:建立頸總動脈球囊

2、損傷后血管狹窄的動物模型。將新西蘭白兔40只隨機分為四組(正常對照組、假手術組、球囊拉傷組、球囊拉傷+苦瓜蛋白組),除正常對照組外,其余三組高脂飲食喂養(yǎng),術后8周耳緣靜脈取血,測血脂水平、NO與ET含量,損傷段頸動脈做病理切片,HE染色,行病理學形態(tài)學檢查,采用圖像分析系統(tǒng)(HMIAS2000軟件)比較不同組間動脈的內、中膜厚度和管腔面積以及管腔平均狹窄程度;采用免疫組織化學方法來觀察動脈壁中的P53與NF-κB、TNF-α與、PCNA

3、蛋白表達,并做定量分析(統(tǒng)計陽性細胞率)。
　　2.動物實驗二:建立頸總動脈套環(huán)后血管狹窄的動物模型。將新西蘭白兔20只隨機分為三組(正常對照組、動脈套環(huán)組、動脈套環(huán)+苦瓜蛋白組),除正常對照組外,其余二組高脂飲食喂養(yǎng)4周后處死,取靜脈血做血脂、NO與ET含量的檢測,套環(huán)段頸動脈做病理切片,HE染色,病理學形態(tài)學檢查,采用圖像分析系統(tǒng)(HMIAS2000軟件)比較不同組間動脈的內、中膜的厚度和管腔面積以及管腔最大狹窄程度;免疫組織

4、化學方法分析動脈壁中的P53與NF-κB、TNF-α、PCNA蛋白表達,并做定量分析(統(tǒng)計陽性細胞率)。
　　結果:
　　病理形態(tài)學檢查的結果顯示:1.球囊拉傷組頸總動脈管腔面積減少,內膜增厚,有大量的泡沫細胞和平滑肌細胞增生,管腔明顯狹窄,而球囊損傷+苦瓜蛋白組泡沫細胞少見,其內膜主要是平滑肌細胞;管腔狹窄程度明顯減輕。2.頸動脈套環(huán)組頸總動脈管腔顯著減少,內膜明顯增厚,內含有泡沫細以及有大量平滑肌細胞增生,發(fā)生了明顯的血

5、管重塑,動脈套環(huán)+苦瓜蛋白組也有泡沫細胞生成,內膜同時顯著增生,管腔狹窄程度雖減輕,但與套環(huán)組相比沒有明顯差異性。
　　免疫組化觀察到:1.球囊拉傷組頸總動脈管壁NF-κB、TNF-α、PCNA蛋白表達增加,而P53蛋白表達減少;而球囊損傷+苦瓜蛋白組頸總動脈管壁TNF-α、NF-κB、PCNA蛋白表達減少,而P53表達增加。2.頸動脈套環(huán)組和動脈套環(huán)+苦瓜蛋白組的頸總動脈管壁TNF-α、NF-κB、PCNA蛋白表達差異沒有顯著性