脂聯(lián)素對(duì)2型糖尿病大鼠大血管TGF-β1、hs-CRP表達(dá)的影響.pdf

1、目的：構(gòu)建2型糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化模型，研究脂聯(lián)素干預(yù)下的動(dòng)脈粥樣硬化大鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）、高敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）的表達(dá)水平，從而探討脂聯(lián)素對(duì)2型糖尿病大血管病變的保護(hù)機(jī)制，為脂聯(lián)素應(yīng)用于臨床治療糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化提供新的思路。
　　方法：選用近交、清潔的雄性Wistar大鼠40只，體重190—230g，隨機(jī)分為對(duì)照組(n=10)和實(shí)驗(yàn)組(n=30)。予普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)4周后，對(duì)照組繼續(xù)予普通飼料喂養(yǎng)，

2、實(shí)驗(yàn)組大鼠予高糖高脂飼料喂養(yǎng)，4周后，空腹12h后將1％STZ按30mg/kg的劑量腹腔注射。對(duì)照組以等量枸椽酸-枸櫞酸鈉緩沖液腹腔注射。于給藥后72h剪尾，用血糖儀及試紙測(cè)隨機(jī)血糖大于等于16.7mmol/L，并出現(xiàn)多飲、多尿、多食等癥狀者，為糖尿病大鼠模型制備成功。繼續(xù)喂養(yǎng)6周，除去造模失敗及死亡大鼠，將剩余的21只糖尿病大鼠模型納入本實(shí)驗(yàn)。再將糖尿病大鼠模型隨機(jī)分為2組：①模型組(n=10)；②藥物組(n=11)：腹腔注射重組脂聯(lián)

3、素15ug/kg，每日1次。8周后處死，處死前將所有大鼠稱重，并用10%水合氯醛按3ml/kg腹腔注射，麻醉后在大鼠的腹主動(dòng)脈采血，離心取上清液，置一70℃保存待測(cè)血糖；其后取胸主動(dòng)脈，4%多聚甲醛固定后用石蠟包埋，切片做HE染色及熒光顯微下觀察，并用免疫組化法測(cè)定TGF-β1、hs-CRP在胸主動(dòng)脈中的表達(dá)。同時(shí)留取胸主動(dòng)脈標(biāo)本，用4％戊二醛固定、脫水、包埋后做超薄切片，于光鏡下觀察胸主動(dòng)脈的病理狀態(tài)。同時(shí)取部分胸主動(dòng)脈置于液氮中冷凍

4、，凍透后置于-70℃保存,用于PCR法測(cè)定大鼠胸主動(dòng)脈hs-CRP、TGF-β1的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠處死后，光鏡下可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組大鼠的胸主動(dòng)脈中有大量泡沫細(xì)胞形成，同時(shí)存在細(xì)胞外基質(zhì)增多、內(nèi)皮細(xì)胞不連續(xù)等動(dòng)脈粥樣硬化的典型病理改變。
　　2.模型組大鼠與對(duì)照組大鼠相比，空腹血糖、餐后2小時(shí)血糖、TC、TG、LDL、hs-CRP、TGF-β1水平顯著升高（P＜0.01），HDL顯著降低（P＜0.05）。

5、　　3.藥物組與模型組相比，空腹血糖、餐后2小時(shí)血糖、TC、TG、LDL、hs-CRP、TGF-β1水平顯著降低（P＜0.05），HDL水平顯著升高（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.Wistar大鼠在高糖、高脂飲食聯(lián)合小劑量STZ腹腔注射的作用下可成功復(fù)制出2型糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化模型。
　　2.hs-CRP、TGF-β1可能與動(dòng)脈粥樣硬化的嚴(yán)重程度成正相關(guān)。
　　3.脂聯(lián)素是2型糖尿病動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)因素