當歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑的抗腫瘤療效及促瘤細胞凋亡的分子機制研究.pdf

1、目的:研究當歸貝母苦參丸單獨及聯(lián)合順鉑化療H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,并通過血清學檢測和腫瘤細胞凋亡相關(guān)分子表達水平的檢測,探討當歸貝母苦參丸抗腫瘤的細胞分子機制及對順鉑化療的減毒作用,為臨床抗腫瘤應(yīng)用提供基礎(chǔ)實驗依據(jù)。
　　方法:建立昆明小鼠H22肝癌細胞株移植瘤動物模型,隨機分為四組:模型組、順鉑對照組、當歸貝母苦參丸組、當歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組,另設(shè)正常空白對照組。給藥15天期間,觀察小鼠的生存狀態(tài),測量小鼠的體重、瘤體長

2、徑和短徑。給藥第15日下午6:00開始進食,不禁水,次日處死小鼠。檢查外周血常規(guī);解剖取瘤體、肝臟、胸腺、脾臟,計算抑瘤率與 q值,計算腫瘤及器官指數(shù);生化方法檢測血清LDH、AST、ALT、AKP的活力及BUN和CR濃度;ELISA方法檢測腫瘤組織HIF-1α的濃度;病理檢查腫瘤、肝臟、胸腺和腎臟;免疫組織化學方法測定腫瘤組織中caspase3和突變型p53蛋白的表達;RT-PCR方法檢測bax和bcl-2 mRNA的表達。
　

3、　結(jié)果:①大體觀察,當歸貝母苦參丸組優(yōu)于模型對照組,當歸貝母苦參丸及順鉑聯(lián)合給藥組優(yōu)于順鉑對照組。雄性小鼠當歸貝母苦參丸組抑瘤率34.1％,聯(lián)合給藥組抑瘤率75.6%,高于順鉑對照組抑瘤率63.4%,q≈1.00;雌性小鼠當歸貝母苦參丸組抑瘤率33.3%,聯(lián)合給藥組抑瘤率80.0%,高于順鉑對照組抑瘤率73.3%。q≈0.97。
　?、谂c模型組比較,當歸貝母苦參丸組腫瘤組織HIF-1α顯著降低(p<0.01),突變型p53蛋白和b

4、cl-2 mRNA的表達顯著下調(diào)(p<0.01),caspase3蛋白和bax mRNA的表達顯著上調(diào)(p<0.01);
　?、叟c順鉑對照組比較,當歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組胸腺指數(shù)、白細胞計數(shù)、caspase3蛋白和bax mRNA的表達顯著升高(p<0.01);當歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組腫瘤組織HIF-1α,血清LDH、AST、ALT、AKP的活性及BUN顯著降低(p<0.01),血清CR降低不顯著;當歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組病理檢查

5、肝小葉、腎小管損傷明顯減輕、胸腺細胞數(shù)量增多;當歸貝母苦參丸聯(lián)合順鉑組突變型p53蛋白和bcl-2 mRNA的表達未顯著降低,但bax/bcl-2的比值顯著升高。
　　結(jié)論:①當歸貝母苦參丸具有抗H22肝癌移植瘤增殖的作用,其作用與下調(diào)腫瘤組織HIF-1α、突變型p53和bcl-2基因的表達,上調(diào)caspase3、bax的表達有關(guān)。②當歸貝母苦參丸與順鉑聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同抗H22肝癌移植瘤增殖的作用,其協(xié)同機制與上調(diào)bax/bcl-