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文檔簡介
1、該研究采用RT-PCR、重組DNA技術(shù),構(gòu)建大鼠GFRα1表達(dá)質(zhì)粒,在大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)大鼠GFRα1的高效表達(dá),并通過金屬螯和層析技術(shù)純化重組蛋白.然后,通過進(jìn)化蹤跡分析、同源序列聯(lián)配及計(jì)算機(jī)軟件模擬GFRα1的二級(jí)結(jié)構(gòu),計(jì)算氨基酸殘基的保守性,親疏水性和溶劑可及面積,選定缺失突變的區(qū)域.利用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù),構(gòu)建了PC12-GFRα1、PC12-RET、PC12-GFRα1-RET和PC12-GFRα1Mn-RET(Mn;GFRα1各突變體
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