HMGA2在Wnt-β-catenin信號通路介導的散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中的作用.pdf

1、大腸腺瘤是一種臨床較常見的具有癌變潛能的大腸良性病變，其組織學類型以管狀腺瘤最為常見。研究表明，大腸腺瘤被認為是大腸癌主要的癌前病變，80％以上的大腸癌是發(fā)生在先存的腺瘤基礎上?！罢４竽c上皮-腺瘤-腺癌”的發(fā)病路徑已被公認為是經典的大腸癌發(fā)病過程。但是大腸腺瘤癌變是一個多基因改變、多階段綜合作用累積的復雜過程，其確切機制仍不明確。因此對大腸腺瘤癌變機制的研究對于大腸癌的預防具有重要意義。
　　Wnt/β-catenin是經典Wn

2、t信號通路途徑，在胚胎發(fā)育及多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程起著重要的作用。目前，已經公認Wnt/β-catenin信號通路是大腸腺瘤癌變過程中的關鍵信號通路之一，該通路的異常激活可以介導大腸腺瘤的癌變。分泌性Wnt蛋白是該途徑的啟動因子，其中Wnt2和Wnt5a主要在胃腸道腫瘤中表達。當細胞受到損傷因素的作用后，Wnt信號結合到卷曲蛋白胞外區(qū)，將胞質中Dsh蛋白募集至胞膜下，使Dsh活化從而抑制由Axin、APC和GSK-3β組成的復合物活性

3、，導致β-catenin不能被GSK-3β磷酸化，進而導致β-catenin不能被降解，致使大量游離的β-catenin聚集在胞質中，隨后進入胞核與轉錄因子TCF/LEF結合，激活其轉錄活性，啟動一系列下游靶分子如c-myc、CDK4、CyclinD1、VEGF等，從而促進腫瘤發(fā)生。β-catenin是Wnt信號通路的核心分子，信號通路激活的關鍵在于β-catenin在細胞質中累積以及其與轉錄因子TCF/LEF的結合。Wnt、β-cat

4、enin、CDK4、CyclinD1是Wnt/β-catenin信號通路的重要組成成分，它們參與調節(jié)細胞增殖、抑制細胞分化及調控細胞周期，起著重要作用。
　　高遷移率蛋白(HMGA2)是一種構架轉錄因子，普遍存在于真核生物中，其自身缺乏轉錄活性，但含有三個特殊的AT鉤結構，這些AT鉤結構可以結合到富集AT序列的染色質上，改變基因的DNA構象，或者直接與相關蛋白發(fā)生作用，繼而增強或者抑制這些基因的轉錄活性，從而影響胚胎形成、組織發(fā)育

5、，引起腫瘤的發(fā)生。HMGA2在分化成熟組織中很少表達或幾乎不表達，而在胚胎期以及不成熟組織中大量表達。近年來大量研究發(fā)現(xiàn)，HMGA2在多種惡性腫瘤組織中出現(xiàn)異常表達，如肺癌、白血病、卵巢癌、大腸癌、甲狀腺癌、胃癌、胰腺癌等，這些腫瘤的發(fā)生、發(fā)展均與HMGA2基因異常表達有關，被認為是一個潛在的腫瘤分子標志物。但目前有關HMGA2在在散發(fā)性大腸管狀腺瘤癌變過程中所起的確切作用及機制，尚缺乏系統(tǒng)性地研究。
　　研究已經發(fā)現(xiàn)，HMGA2

6、與TCFs家族中的TCF/LEF有一定的相似結構域，即含有HMG的DNA結合域，它能夠增強β-catenin與TCF/LEF結合的轉錄活性，與Wnt/β-catenin信號通路關系密切。有研究表明HMGA2在轉基因小鼠乳腺癌中可能受Wnt10b/β-catenin信號通路調控而影響腫瘤的增殖;在胃癌中HMGA2的異常表達可能會激活Wnt/β-catenin信號通路，從而促進EMT的進程。二者之間可能存在相互調控的作用。因此，鑒于Wnt/

7、β-catenin信號通路在大腸腺瘤癌變中的重要作用以及HMGA2與Wnt/β-catenin信號通路之間可能存在的相互調控作用，使得我們思考一個問題:HMGA2和Wnt/β-catenin信號通路是否共同參與調控散發(fā)性大腸管狀腺瘤的癌變以及它們之間發(fā)揮怎樣的調控作用，目前國內外尚未見相關報道。
　　本實驗第一部分首先選取大腸癌細胞株，采用siRNA技術、Realtime-PCR及Western blot方法，探討HMGA2與經典