力學(xué)刺激對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠成骨細(xì)胞作用的細(xì)胞分子基礎(chǔ).pdf

1、四川大學(xué)博士學(xué)位論文力學(xué)刺激對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松大鼠成骨細(xì)胞作用的細(xì)胞分子基礎(chǔ)姓名：李良申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師：陳槐卿20040512力孕剎激對(duì)絕經(jīng)后甘質(zhì)從松大民成骨細(xì)胞作用的細(xì)胞分子基抽—李良confluence)，給細(xì)胞施加力學(xué)刺激，頻率為1Hz，力學(xué)刺激分別為40010004000，strain:作用時(shí)間分別為每天30min248h，共加載兩天。以未受力學(xué)刺激的細(xì)胞為對(duì)照組，受力學(xué)刺激的細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)組，并進(jìn)行比較。

2、采用流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定integrin。:，0，，0a在成骨細(xì)胞膜上的表達(dá)量、細(xì)胞周期分布與細(xì)胞增殖變化采用同位素標(biāo)記方法檢測(cè)成骨細(xì)胞骨鈣素、I型前膠原C端前膚(PICP)和總蛋白的分泌量采用鬼筆環(huán)膚染色肌動(dòng)蛋白(Factin)，在熒光共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果表明:1)3ovx組和6ovx組大鼠切除卵巢3月后，雌激素分泌量降低，骨量減少，骨力學(xué)性能下降，表現(xiàn)出與婦女絕經(jīng)后相似的高骨轉(zhuǎn)換率骨質(zhì)疏松。2)在靜態(tài)培養(yǎng)條件下，從

3、各組大鼠分離的顱頂骨成骨細(xì)胞均有integrina200a蛋白水平的表達(dá)，其中0:表達(dá)量最高。6ovx組成骨細(xì)胞integrina20，的表達(dá)量明顯降低:其余各組間無(wú)明顯差異.3)在靜態(tài)培養(yǎng)條件下，3ovx組和6ovx組大鼠成骨細(xì)胞增殖活性明顯增高，這與絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松骨代謝的高轉(zhuǎn)換率相一致。4)3control組成骨細(xì)胞對(duì)力學(xué)刺激YA敏感，較小的力學(xué)應(yīng)變(400“strain)作用就可上調(diào)integrina20，、0。的表達(dá)量，促進(jìn)成骨

4、細(xì)胞合成骨基質(zhì)的能力增加，促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖、分化。在1000tstrain力學(xué)刺激下，3control組成骨細(xì)胞integrina200:的表達(dá)量出現(xiàn)明顯上調(diào)，成骨細(xì)胞合成骨基質(zhì)的能力增加也最為明顯。在4000ustrain力學(xué)刺激下，3control組成骨細(xì)胞integrina:，0，，0。的表達(dá)量進(jìn)一步增高，對(duì)3control組成骨細(xì)胞的作用主要是增加成骨細(xì)胞的增殖活性，抑制成骨細(xì)胞的分化成熟。5)6control組成骨細(xì)胞對(duì)力學(xué)

5、刺激的敏感性低于3control組成骨細(xì)胞。在10001strain力學(xué)刺激下，成骨細(xì)胞integrina200，的表達(dá)量出現(xiàn)上調(diào):在4000ustrain力學(xué)刺激下，成骨細(xì)胞integrina。，0，，0，的表達(dá)量明顯上調(diào)，成骨細(xì)胞合成骨基質(zhì)的能力與增殖活性增加。但力學(xué)刺激對(duì)6control組成骨細(xì)胞合成分泌功能和細(xì)胞增殖活性的影響明顯于小于對(duì)3control組成骨細(xì)胞的影響。6)3ovx組和6ovx組在4444ustrain力學(xué)刺激