實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病大血管病變發(fā)病機(jī)制及羅格列酮干預(yù)的研究.pdf

1、目的：糖尿病大血管病變主要為動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的病理改變，是2型糖尿病的主要慢性并發(fā)癥之一，其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，其中以核因子-κB(NF-κB)家族為調(diào)控中心的炎癥反應(yīng)在AS發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用。羅格列酮(RSG)屬于噻唑烷二酮類藥物，是一種新型抗糖尿病的胰島素增敏劑，該藥物除了具有改善胰島素抵抗、降低血糖水平的作用外，近年來發(fā)現(xiàn)尚有抗AS的性能。對2型糖尿病患者的大血管危險(xiǎn)因素有一定的有益作用。因此，本研究通過喂養(yǎng)高糖高脂

2、飲食使大鼠出現(xiàn)胰島素抵抗(IR)再通過腹腔注射小劑量的鏈脲菌素(STZ)，建立具有胰島素抵抗的T2DM大鼠模型，并分別給胰島素抵抗和糖尿病模型以羅格列酮治療，探討NF-κB和血管細(xì)胞間黏附分子(VCAM-1)、細(xì)胞間黏附分子(ICAM-1)以及單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP-1)在糖尿病大鼠大血管病變形成中的作用，以及羅格列酮保護(hù)大血管的作用機(jī)制。并應(yīng)用電鏡觀察胰島素抵抗及糖尿病大鼠主動(dòng)脈的形態(tài)學(xué)改變。 方法：S-D大鼠隨機(jī)分為3組：

3、對照組(NC組)、胰島素抵抗組(IR組)、2型糖尿病組(DM組)正常對照組喂養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料，胰島素抵抗及糖尿病組飼以高糖高脂飼料。8周后，從NC組隨機(jī)抽取5只從IR及DM組隨機(jī)抽取5只采血測定血糖和胰島素并應(yīng)用正葡萄糖-高胰島素鉗夾技術(shù)評價(jià)動(dòng)物模型胰島素敏感性，出現(xiàn)胰島素抵抗，并對DM組以腹腔注射小劑量的鏈脲佐菌素(STZ，25mg/kg)，損傷部分胰腺，使之出現(xiàn)高血糖。第11周把胰島素抵抗組隨機(jī)分為胰島素抵抗對照組(IR組)、胰島素抵

4、抗應(yīng)用羅格列酮治療組(TIR組)；糖尿病大鼠隨機(jī)分為糖尿病對照組(DM組)、糖尿病羅格列酮治療組(TDM組)、從實(shí)驗(yàn)第11周起，TIR和TDM組以羅格列酮2mg/kg/d溶于蒸餾水灌胃，每日一次；NC組、IR組、DM組分別給予等量蒸餾水，共8周。實(shí)驗(yàn)全程共持續(xù)18周。第18周末實(shí)驗(yàn)結(jié)束前測量大鼠體重，心臟采血氧化酶法測定空腹血糖(FBG)；放射免疫分析法測定血清胰島素(FINS)；全自動(dòng)生化分析儀測定血脂四項(xiàng)包括：血清甘油三酯(TG)、

5、血清總膽固醇(TC)低密度脂蛋白(LDL)，高密度脂蛋白(HDL)；免疫比濁法測定血清C反應(yīng)蛋白(CRP)。分離和摘取主動(dòng)脈，應(yīng)用光鏡和電鏡觀察主動(dòng)脈形態(tài)及病理變化，用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)或凝膠電泳遷移率分析(EMSA)方法分別檢測主動(dòng)脈NF-κBDNA結(jié)合活性及ICAM-1、VCAM-1和MCP-1的基因表達(dá)水平。 結(jié)論： (1)通過8周的高脂高糖飲食對照組大鼠出現(xiàn)肥胖，脂代謝紊亂，和高胰島素血癥并應(yīng)用正

6、葡萄糖高胰島素鉗夾技術(shù)證明IR模型復(fù)制成功。在此基礎(chǔ)上給予小劑量STZ注射后，對照組大鼠出現(xiàn)血糖升高，成功復(fù)制出2型糖尿病模型，它具有高胰島素、高血脂等多個(gè)致病因素。是研究2型糖尿病及其血管并發(fā)癥的理想動(dòng)物模型。 (2)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)利用光鏡和電鏡觀察到IR和DM大鼠主動(dòng)脈出現(xiàn)明顯的病理改變和內(nèi)膜損傷。 (3)在2型糖尿病發(fā)生發(fā)展的過程中，動(dòng)脈壁早期就出現(xiàn)了以NF-κB的活化為中心環(huán)節(jié)的炎癥反應(yīng)，而炎癥反應(yīng)起始階段的關(guān)鍵因素

7、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1也隨之增加，從而啟動(dòng)了AS的進(jìn)程。提示在糖尿病早期阻斷這一環(huán)節(jié)可能可以預(yù)防或延緩糖尿病大血管并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展。 (4)羅格列酮可以改善糖尿病大鼠存在的諸多代謝紊亂，改善動(dòng)脈的病理損傷，減輕動(dòng)脈壁的炎癥反應(yīng)，從而緩解了糖尿病大血管AS的進(jìn)程。表明羅格列酮除了改善胰島素抵抗綜合征外尚作用于與AS發(fā)生有關(guān)的炎性細(xì)胞因子而具有獨(dú)特的保護(hù)大血管的作用。早期應(yīng)用羅格列酮可以有效預(yù)防糖尿病大血管并發(fā)癥的發(fā)