新型非環(huán)核苷膦酸類抗HBV前藥合成、藥理活性及主客體化學研究.pdf

1、阿德福韋酯(Adefovir Dipivoxil)是上市的第一個非環(huán)核苷膦酸酯類抗HBV藥物，臨床研究表明該藥物能明顯改善乙肝患者肝臟組織學性質，降低血清HBV-DNA及轉氨酶水平,特別是能有效抑制對拉米夫定、恩曲他濱、泛昔洛韋等產(chǎn)生耐藥性的乙肝病毒株。然而該藥物在臨床使用過程中出現(xiàn)的劑量依賴性腎毒性限制了其臨床應用，使得尋找性能更優(yōu)的新型非環(huán)核苷膦酸類前藥成為抗HBV的研究重點。
　　本論文在前期研究中發(fā)現(xiàn)阿德福韋雙 L-氨基酸

2、酯前藥能增強原藥阿德福韋抗HBV活性、降低細胞毒性的基礎上，進一步以其為先導化合物，根據(jù)病理與藥理學研究發(fā)現(xiàn)非甾體抗炎藥能有效抑制有機陰離子轉運體1（hOAT1）介導的阿德福韋膦酸雙負離子跨腎小管基底膜轉運從而降低后者腎毒性的研究結果，采用拼合設計原理在先導化合物膦酸基上引入非甾體抗炎藥物結構片段設計、合成阿德福韋單 L-氨基酸酯，單非甾體藥物羧酸酯前藥,以期發(fā)現(xiàn)具有較高抗病毒活性、較低腎毒性的抗HBV阿德福韋前藥。
　　本論文中

3、我們按照以下步驟合成目標化合物，首先在DCC、DMAP存在下以N-Boc L-氨基酸、非甾體抗炎藥物（布洛芬、氟比羅芬、酮洛芬），2-溴乙醇與3-溴-1-丙醇為原料制備N-Boc L-氨基酸2-溴乙基酯與3-溴丙基酯片段以及非甾體抗炎藥的2-溴乙基酯，3-溴丙基酯片段；而后通過以上述結構片段與阿德福韋在N,N′-二環(huán)己基-4-嗎啉基-咪(DCMC)的存在下通過“一鍋合成法（One Pot Synthesis）”縮合，后經(jīng)85％磷酸脫去N

4、-叔丁氧羰基制備了26個阿德福韋單L-氨基酸酯，單羧酸酯目標化合物，結構確證表明所得產(chǎn)物與設計目標化合物結構一致。
　　本論文分別采用HK-2與HepG22.2.15細胞模型進行化合物體外腎細胞毒性與抗HBV活性評價?？笻BV活性結果表明化合物均具有HBV-DNA抑制活性而且細胞毒性（CC5036.61~447μmol.L-1）明顯低于陽性對照藥物Adefovir dipivoxil（CC501.23μmol.L-1）；腎細胞毒性

5、測試結果表明化合物作用HK-2細胞24h及48h后，細胞活力與LDH的釋放率均優(yōu)于陽性對照Adefovir dipivoxil?？笻BV活性與HK-2細胞毒性評價結果表明，采用阿德福韋單L-氨基酸丙酯、單非甾體抗炎藥羧酸丙酯前藥設計策略獲得的化合物具有抗HBV活性并且細胞毒性明顯低于Adefovir dipivoxil，同時其腎細胞毒性明顯低于Adefovir dipivoxil，表明化合物有進一步研究價值。
　　此外，本論文研究

6、了阿德福韋雙 L-苯丙氨酸丙酯（FH-1）與瓜環(huán)(cucurbit[n]uril，n=6-8)的主客體相互作用機理，通過1H NMR、熒光光譜、紅外光譜（FT-IR）分析手段對主客體包合物進行了結構表征，并對包合物的吸濕穩(wěn)定性以及抗病毒活性進行了考察。結果證實了阿德福韋雙 L-苯丙氨酸丙酯與瓜環(huán)之間存在主客體包合作用關系，包合物吸濕穩(wěn)定性與抗HBV活性明顯優(yōu)于客體分子。這些研究結果為將人工合成受體作用模式引入阿德福韋雙 L-氨基酸酯類衍