誘導(dǎo)型一氧化氮合酶和血管內(nèi)皮生長因子-C在舌癌淋巴轉(zhuǎn)移中的表達及相關(guān)性研究.pdf

1、舌癌(Carcinomaoftongue)是發(fā)生于舌粘膜的鱗狀上皮的惡性腫瘤，是最常見的口腔癌。因舌體具有豐富的淋巴管和血液循環(huán)，加以舌的機械運動頻繁，舌癌常發(fā)生于早期的頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，而目前主要的治療方法是手術(shù)治療，但術(shù)后復(fù)發(fā)率高，常造成患者語言、進食、呼吸等基本生活功能障礙及顏面頸部畸型，嚴重影響患者生活質(zhì)量和心理狀態(tài)，對于舌癌的侵襲及復(fù)發(fā)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移機制仍未明確。但目前已經(jīng)知道血管生成及癌周淋巴管的生成在腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移中起著重要作

2、用。近年來，研究發(fā)現(xiàn)在眾多實體腫瘤中可檢測到誘導(dǎo)型一氧化酶(induciblenitricoxidesyntlaase，iNOS)和血管內(nèi)皮生長因子-C(vascularendothelialgrowthfactor—C，VEGF-C)的過度表達，這兩者在腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移過程中都有較強的促進血管形成和淋巴管形成的作用。 一氧化氮(nitricoxide，NO)是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)催化

3、底物左旋精氨酸合成的一種具有多種生物學(xué)活性的氣體分子，它既具有第二信使和神經(jīng)遞質(zhì)的功能，又是殺傷腫瘤細胞的效應(yīng)分子。NOS有三種亞型，分別由不同的基因編碼，即神經(jīng)元型NOS(neuronalNOS，nNOS)，誘導(dǎo)型NOS(inducibleNOS，iNOS)和內(nèi)皮型(endothelialNOS，eNOS)。其中iNOS在NO介導(dǎo)的腫瘤生長及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移起主要作用，并在人體多種腫瘤組織中檢測到它的過度表達。VEGF是一組分泌性糖蛋白，可

4、調(diào)節(jié)血管發(fā)生，淋巴管生成及血管、淋巴管通透性。近年來研究發(fā)現(xiàn)VEGF家族成員之一VEGF—C通過與其受體VEGFR-3結(jié)合，在腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。 近年來，VEGF—C和iNOS在腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移發(fā)展過程中的作用已受到關(guān)注，并在多種腫瘤中表達上調(diào)，在目前國內(nèi)外文獻中對舌癌及淋巴轉(zhuǎn)移中iNOS和VEGF-C的表達情況及相互間聯(lián)系的研究尚少見報道。 研究目的： 本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測iNOS、VEGF—C

5、在舌癌中的表達情況，揭示iNOS、VEGF—C的相互關(guān)系及其和微淋巴管密度(LVD)以及舌癌臨床病理特征之間的關(guān)系，探討兩者在舌癌發(fā)生發(fā)展及淋巴轉(zhuǎn)移過程中的作用及兩者之間可能存在的相互作用機制，為舌癌的抗淋巴轉(zhuǎn)移的治療提供理論基礎(chǔ)。 材料和方法： 1、標本收集 收集自2000—2007年在中山二院手術(shù)切除的舌癌標本60例，患者術(shù)前未經(jīng)任何治療。 2、實驗方法 用S—P免疫酶染色法檢測iNOS，VE

6、GF-C。 3、結(jié)果判斷 所有切片均經(jīng)過病理科醫(yī)生協(xié)助觀察，細胞的胞漿或者胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，細胞核著藍色為陰性。iNOS和VEGF-C的結(jié)果判斷根據(jù)高倍鏡下陽性細胞所占比例及著色強度綜合制定免疫組化半定量記分。按Weidner法進行微淋巴密度計數(shù)，計算3個200倍視野淋巴管的總數(shù)作為該例的LVD值。 4、統(tǒng)計分析 計數(shù)資料采用x2檢驗或精確概率法比較兩組或多組間陽性率的差別。計量資料分別采用t檢

7、驗和單因素方差分析進行兩組與多組之間樣本均數(shù)的比較。P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。P<0.01為差異有明顯差異性。上述檢驗均采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果： 1、iNOS、VEGF—C在舌癌中的表達 iNOS在正常舌組織、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌的陽性表達率分別為：0、26.67％、53.33％，P<0.05，各組間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義；VEGF—C在正常舌組織、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌、有

8、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌中的陽性表達率分別為0、30.00％、63.33％，P<0.05，各組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義；正常舌組織、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移舌癌中的LND計數(shù)分別為1.0、16.43、25.86，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 2、iNOS、VEGF—C和LND的關(guān)系 24例iNOS陽性表達的舌癌中微淋巴管密度為20.50±2.50，36例iNOS陰性表達的舌癌中微淋巴管密度為13.40±3.30，P<0.05，

9、差異有統(tǒng)計學(xué)意義。28例VEGF-C陽性表達的舌癌中微淋巴管密度為27.60±3.50，32例VEGF—C陰性表達的舌癌中微淋巴管密度為16.80±3.70，P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 3、iNOS、VEGF—C與舌癌臨床病理特征的關(guān)系 iNOS表達與舌癌大小，臨床分期，等臨床病理特征無關(guān)，與轉(zhuǎn)移有關(guān)；VEGF—C表達與舌癌大小，臨床分期等臨床病理特征無關(guān)，與轉(zhuǎn)移有關(guān)。 4、iNOS與VEGF—C在舌癌中表

10、達的相關(guān)性 iNOS與VEGF—C在舌癌中表達的相關(guān)性經(jīng)過Spearman檢驗，相關(guān)系數(shù)0.668，P<0.05，兩者呈正相關(guān)。 結(jié)論： 1、iNOS有促進舌癌癌周淋巴管形成的作用，且與舌癌的淋巴轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系。 2、VEGF—C有促進舌癌癌周淋巴管形成的作用，且與舌癌的淋巴轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系。 3、iNOS與VEGF—C有著密切的關(guān)聯(lián)性，VEGF—C水平和iNOS活性，以及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的出現(xiàn)之間