海洋微藻的活性篩選及兩種植物活性成分的研究.pdf

1、本論文由三部分構(gòu)成：1.海洋微藻的抗腫瘤以及抗氧化活性篩選；2.藏藥肉果草活性成分的研究；3.海藻精活性成分的研究。 海洋微藻是海洋生態(tài)系統(tǒng)中最主要的初級(jí)生產(chǎn)者，也是海洋生物資源的重要組成部分。海洋微藻能代謝產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎而且具有特定生物活性的有機(jī)化合物，是一類(lèi)潛在的藥用海洋生物資源。為了從我國(guó)豐富的海洋微藻資源中尋找具有特定生物活性的微藻，本論文采用海蝦生物致死法、SRB法、TLC自顯影技術(shù)、DPPH方法和HPLC-UV分析方法

2、，并以海蝦致死率、小鼠白血病細(xì)胞P388的細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)(包括細(xì)胞壞死)以及自由基清除率為活性指標(biāo)，對(duì)90株海洋微藻的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了體外抗腫瘤和抗氧化活性篩選，發(fā)現(xiàn)10株微藻的代謝產(chǎn)物具有海蝦生物致死活性，5株微藻的代謝產(chǎn)物具有抗腫瘤活性，1株微藻的代謝產(chǎn)物具有抗氧化活性。 藏藥植物由于其藥材資源生長(zhǎng)環(huán)境的特殊性使其有效成分的含量和生物活性大大高于內(nèi)地同類(lèi)藥用植物，具有獨(dú)特療效并日益受到重視。藏藥植物肉果草具有養(yǎng)肺排膿、清熱止咳以

3、及治療肺炎、肺膿腫、哮喘、咯血、咳嗽失音、癰腫瘡瘍、心臟病、血性腫瘤(血癌)、腸絞痛、腸粘連的作用。本論文對(duì)藏藥肉果草的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，并評(píng)價(jià)了其體外抗腫瘤活性，為研究藏藥肉果草化學(xué)成分與其藥理活性的關(guān)系提供了一定的依據(jù)。對(duì)肉果草藏藥材全草的乙醇提取物采用大孔樹(shù)脂柱層析、減壓硅膠柱層析、常壓硅膠柱層析、凝膠柱層析(Sephadex LH-20)、反相硅膠柱層析和反相制備高效液相(HPLC)等分離手段得到13個(gè)單體化合物(1～1

4、3)。利用其理化性質(zhì)和譜學(xué)特征(IR，UV，MS，NMR)結(jié)合化學(xué)反應(yīng)的方法(水解、乙酰化反應(yīng))闡述了其中13個(gè)化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)(化合物結(jié)構(gòu)及名稱(chēng)參見(jiàn)Table 1)，其中新化合物4個(gè)(1-4)。所得的化合物主要是木脂素類(lèi)化合物11個(gè)(1-11)，和黃酮類(lèi)化合物2個(gè)(12-13)，分別為：lantibeside B(1)，lantibeside C(2)，lantibeside D(3)，lantibetin(4)，phillyrin(

5、5)，simplexoside(6)，sesaminol-2'-O-β-D-glucoside(7)，phillygenol(8)，lantibeside(9)，tibeticoside A(10)，O-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethyl-3-O-α-L-rhanmopyranosyl-4-O-[(E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propenoyl]-β-D-glucopyranoside(11

6、)，apigenin(12)和5,4'-dihydroxyflavone(13)。 本論文又對(duì)膠南明月海藻集團(tuán)生產(chǎn)的海藻精化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。海藻精是海帶(Laminaria japonica)的提取物，濃縮了海帶的全部營(yíng)養(yǎng)成分，可以防止腦中瘋、低智癥、短軀癥，堅(jiān)固牙齒和骨骼，增加血紅蛋白，防止貧血癥，平衡人體酸堿度，防止酸毒癥及疲勞癥等治療作用。本論文采用上述分離手段從海藻精中得到6個(gè)單體化合物(14-19)(化合物結(jié)構(gòu)

7、及名稱(chēng)參見(jiàn)Table 1)，利用理化性質(zhì)和譜學(xué)特征(UV、IR、MS、1D-NMR和2D-NMR)闡明了6個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)，分別為：Aurantiamide acetate(14)，N-Benzoyl-L-phenylalanino(15)，Loliolide(16)，F(xiàn)ucosterol(17)，26,27-Dinorcholesta-5,24-dien-3β-ol(18)，Thymidine(19)。 利用MTT法、SRB法，

8、對(duì)單體化合物的抗腫瘤活性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。化合物2和化合物3對(duì)HL60細(xì)胞具有微弱的抑制作用，IC50值為61和99μM?；衔?8對(duì)P388細(xì)胞具有微弱的抑制作用，IC50值為40μM。 本論文對(duì)90株海洋微藻的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了體外抗腫瘤和抗氧化活性篩選，其中10株微藻的代謝產(chǎn)物具有海蝦生物致死活性，5株微藻的代謝產(chǎn)物具有抗腫瘤活性，1株微藻的代謝產(chǎn)物具有抗氧化活性，此結(jié)果為后期深入進(jìn)行微藻的活性成分研究奠定了一定的基礎(chǔ)。對(duì)藏藥肉