骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)退變椎間盤中營養(yǎng)和分化效應(yīng)的消長.pdf

1、目的：觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）移植在修復(fù)退變椎間盤過程中發(fā)揮的作用，以及營養(yǎng)效應(yīng)與類髓核分化效應(yīng)的變化規(guī)律。 方法：用針吸髓核法建立兔的椎間盤退變模型，采取體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)MSCs，并用含有綠色熒光蛋白（GFP）標(biāo)記的腺病毒轉(zhuǎn)染使之?dāng)y帶有GFP，在造成退變模型2周后以5×106個細(xì)胞/ml的濃度植入手術(shù)節(jié)段的椎間盤內(nèi)。用免疫熒光結(jié)合激光共聚焦顯微成像技術(shù)、免疫組化技術(shù)、間苯三酚分光光度法檢測MSCs的增殖、蛋白多糖

2、、Ⅱ型膠原含量的變化。用間接免疫熒光雙標(biāo)以及激光共聚焦顯微鏡觀測MSCs表達(dá)的轉(zhuǎn)化生長因子β1、胰島素樣生長因子1和低氧誘導(dǎo)因子1α、Ⅱ型膠原等在1、2、4、8周術(shù)的表達(dá)并定量分析。 結(jié)果：GFP標(biāo)記的MSCs移植后能夠成活并增殖：1周（9．09±1．87）％，2周（13．64±2．72）％，4周（21．27±2．55）％，8周（34．41±4．18）％；增加蛋白多糖（mg/100mg）：8周時MSCs移植組（4．564±0．0

3、84），退變組（3．132±0．130）；增加Ⅱ型膠原含量：Ⅱ型膠原免疫組化切片灰度值（越高染色越淺）8周時MSCs移植組（141．98±1．50），退變組（160．01±3．88）。代表MSCs營養(yǎng)效應(yīng)的轉(zhuǎn)化生長因子β1、胰島素樣生長因子1在2周左右達(dá)到高峰，分別為（22．68±6．83）％、（35．67±6．56）％，之后開始降低；代表類髓核分化效應(yīng)的低氧誘導(dǎo)因子1α、Ⅱ型膠原在8周中均呈上升趨勢，8周最高，分別為（55．35±14