COPD的粘液分泌機制研究.pdf

1、目的通過檢測慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者氣道上皮的Ca<'2+>激活的氯離子通道l(CaCC<,l>)和黏蛋白MUC5AC、黏膜下腺黏蛋白的表達，以探討COPD患者氣道黏液高分泌的機制。 方法取2004年華西醫(yī)院胸外科手術病人45份離體肺標本，其中輕度COPD組(8人)、中重度COPD組(17)和正常對照組(20人)，分別用RT-PCR、原位雜交、免疫組化、阿辛蘭-PAS染色檢測氣道上皮細胞CaCC<,l>、M17C5AC以

2、及黏蛋白的表達。分別計算三組標本RT-PCR目標條帶與內(nèi)對照光密度比值及計算原位雜交、免疫組化三組標本氣道上皮與背景光密度比值并進行統(tǒng)計分析。計算阿辛蘭—PAS染色三組標本黏膜下腺著色面積與同視野下支氣管組織面積比值然后進行統(tǒng)計分析。 結果與正常對照組相比較，COPD組患者氣道上皮CaCC<,1>表達較對照組增強(P=0.01)，并且CaCC<,l>的表達增強與COPD患者的氣道氣流受限嚴重程度呈正相關。COPD組患者氣道上皮M

3、UC5AC表達較對照組增加(P=0.01)；COPD組黏膜下腺分泌黏蛋白較對照組增加(P=0.01)。其氣道上皮CaCC<,1>表達與FEV<,1>／FVC、FEV<,1>％Pred、V<,50>％Pred、V<,25>％Pred成負相關(P=0.01、P=0.01、P=0.03、P=0.03)，相關系數(shù)分別為-0.43、-0.43、-0.35、-0.36。COPD患者氣道上皮CaCC<,1>mRNA表達與患者氣道上皮MUC5ACmRN

4、A表達、黏膜下腺著色面積成正相關(P=0.02，P=0.01)，相關系數(shù)為0.39，0.46。COPD患者氣道上皮MUC5AC mRNA表達與其FEV<,1>／FVC、FEV<,1>％pred、V<,50>％pred、V<,25>％pred成負相關(P=0.01、P=0.01、P=0.01、P=0.01)，相關系數(shù)分別為—0.53、—0.53、—0.48、—0.43；與黏膜下腺黏液著色面積成正相關(P=0.02)，相關系數(shù)為0.43。

5、 結論 COPD患者的氣道上皮CaCC<,l>較對照組表達增加，CaCC<,1>可能參與了COPD患者氣道黏液分泌的調節(jié)。 目的通過檢測慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者氣道上皮水通道5(Aquaporin-5，AQP<,5>)和黏蛋白MUC5AC、黏膜下腺黏蛋白的表達，以探討COPD患者氣道黏液高分泌的機制。方法取2004年華西醫(yī)院胸外科手術病人離體標本，根據(jù)術前檢查結果將患者分為輕度COPD組(8人)、中重度COPD

6、組(17)和對照組(20人)，分別用RT-PCR、原位雜交、免疫組化、阿辛蘭—PAS染色檢測氣道上皮細胞AQP5、MUC5AC以及黏蛋白的表達。計算三組標本RT-PCR目標條帶與內(nèi)對照光密度比值及分別計算原位雜交、免疫組化三組標本氣道上皮與背景光密度比值進行統(tǒng)計分析。計算阿辛蘭—PAS染色三組標本黏膜下腺著色面積與同視野下支氣管組織面積比值進行統(tǒng)計分析。 結果與正常對照組相比較，COPD組患者氣道上皮AQP<,5>表達較對照組減

7、弱(P=0.01)，兩組患者肺組織AQP5表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。-并且AQP<,5>的表達減弱與COPD患者的氣道氣流受限嚴重程度有關。COPD組患者氣道上皮M1JC5AC表達較對照組增加(P=0.01)：COPD組黏膜下腺分泌黏蛋白較對照組增加(P=0.01)。黏膜下腺AQP<,5>mRNlA表達與患者FEV<,1>／FVC、FEV<,1>[％]pred、V<,50>[％]pred、V<,25>[％]pred成正相關 (P

8、=0.01、P=0.01、P=0.01、P=0.01)，相關系數(shù)分別為0.60、0.60、0.55、0.45；與患者氣道上皮MUC5ACmRNA表達成負相關(P=0.01)，相關系數(shù)為-0.45；與黏膜下腺著色面積成負相關(P=0.01)，相關系數(shù)為-0.61。氣道上皮MUC5AC mRNA表達與患者FEV<,1>／FVC、FEV<,1>％pred、V<,50>％pred、V<,25>％pred成負相關(P=0.01、P=0.01、P=