TIRAP和TLR2基因多態(tài)性與結(jié)核分枝桿菌易感性相關(guān)性研究.pdf

1、目的:結(jié)核病是一種致死性傳染性疾病，事實(shí)上每年大約有200萬人死于結(jié)核。本實(shí)驗(yàn)通過檢測TIRAP的rs595209、rs7932766、rs8177374和rs8177400四個(gè)位點(diǎn)與TLR2的rs5743708和rs3804099兩個(gè)位點(diǎn)基因多態(tài)性，分析它們與結(jié)核病易感性之間的關(guān)系。
　　 方法:采用病例和對照研究方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。選取在河北省胸科醫(yī)院住院的河北石家莊地區(qū)漢族結(jié)核病患者280例作為活動(dòng)性結(jié)核病例組，選取籍貫為河

2、北石家莊地區(qū)的、與結(jié)核病人密切接觸的漢族醫(yī)生、護(hù)士222例作為隱性感染者;選取在河北省人民醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的河北省石家莊地區(qū)漢族人187例為對照。采集所有研究對象的空腹EDTA抗凝靜脈血，并提取血樣基因組DNA。在樣本中測序檢測TIRAP與TLR基因中可能存在的基因多態(tài)性，利用多重SNaPshot分析法對三組研究對象中TIRAP的4個(gè)SNPs即rs595209，rs7932766， rs8177374，rs8177400和TLR2的2個(gè)

3、SNPs即rs5743708，rs3804099進(jìn)行分型分析，并通過統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析這些基因的多態(tài)性與結(jié)核病易感性之間的相關(guān)性。
　　 結(jié)果:
　　 1、本研究中所有研究對象均通過隨機(jī)方式選取的，沒有對性別和年齡進(jìn)行控制。三組間性別比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=63.770，P=0.000)，進(jìn)一步做兩兩比較，LTBI組男性所占比例為32.0％，低于對照組(56.1％)，ATB組男性所占比例為67.5％，高于對照組(56.

4、1％)和LTBI組(32.0％)，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0167);三組年齡比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=4.160，P=0.016），進(jìn)一步做兩兩比較，LTBI組平均年齡為42.10±12.76，高于對照（37.73±10.79），其余兩兩比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　 2、三組研究對象各基因型頻率觀察值與預(yù)期值經(jīng)X2檢驗(yàn)，均沒有顯著性差異（均P＞0.05），三組研究對象均符合Hardy-Weinberg遺

5、傳平衡定律，研究對象具有代表性。
　　 3、X2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，TLR2基因的兩個(gè)SNPs位點(diǎn)，它們的等位基因及基因型在結(jié)核病患者組與正常對照組之間、結(jié)核病患者組與隱性感染組之間及隱性感染組與正常對照組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。TIRAP的4個(gè)SNPs位點(diǎn)中，rs8177400無基因多態(tài)性。rs7932766只存在CC和CT兩種基因型，在結(jié)核病患者組與正常對照組之間，及結(jié)核病患者組與隱性感染者之間等位基因及基因型分布上的

6、差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但是在隱性感染組與正常對照組之間等位基因及基因型均有顯著差異（P＜0.05）。與正常對照組相比，隱性感染組無論T等位基因還是CT基因型均與結(jié)核易感性相關(guān)(OR=0.22，95％CI=0.06-0.81; OR=0.22，95％CI=0.06-0.80)，說明等位基因T及基因型CT為結(jié)核發(fā)病的一個(gè)保護(hù)性因素。
　　 4、進(jìn)一步進(jìn)行多因素方差分析發(fā)現(xiàn)，在控制性別和年齡后，TLR2的rs3804099

7、位點(diǎn)的CC基因型在活動(dòng)結(jié)核組與正常對照組之間比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。CC基因型與結(jié)核易感性相關(guān)(OR=2.04，95％CI=1.04-4.08)，是結(jié)核病發(fā)病的危險(xiǎn)因素。TIRAP的rs7932766在多因素方差分析中，基因型CT仍然為結(jié)核發(fā)病的一個(gè)保護(hù)性因素(OR=0.26，95％CI=0.69-0.97)。
　　 5、經(jīng)單因素和多因素分析，TLR2的rs5743708及TIRAP的rs595209、rs8177

8、374位點(diǎn)的基因型及等位基因分布在各組均未有明顯差異(P＞0.05)，說明這3個(gè)位點(diǎn)均不是石家莊市地區(qū)漢人結(jié)核易感因素。rs8177400無基因多態(tài)性。
　　 結(jié)論:
　　 1、X2檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，TLR2的rs3804099與結(jié)核易感性無相關(guān)性。控制性別和年齡因素后，TLR2的rs3804099的CC基因型與結(jié)核易感性相關(guān)，是石家莊地區(qū)漢人結(jié)核發(fā)病的一個(gè)危險(xiǎn)因素，
　　 2、經(jīng)單因素和多因素分析，TIRAP的rs79