白介素4受體基因多態(tài)性與變應(yīng)性鼻炎的關(guān)系研究.pdf

1、目的與意義:變應(yīng)性鼻炎(AllergicRhinitis，以下簡(jiǎn)稱(chēng)AR)的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，其發(fā)生與許多細(xì)胞因子有關(guān)，以血清中IgE、白介素4(IL-4)、IL-5水平顯著升高為特點(diǎn)。發(fā)作時(shí)細(xì)胞因子的產(chǎn)生及炎性介質(zhì)(mediator)的參與均與機(jī)體異常的免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，即存在T輔助細(xì)胞亞群功能失調(diào)，通過(guò)釋放細(xì)胞因子，促進(jìn)IgE的合成與分泌，并增加炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)和活化。細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)失調(diào)可能是變應(yīng)性疾病發(fā)生的分子生物學(xué)基礎(chǔ)之一。IL-4是最強(qiáng)的I

2、gE調(diào)節(jié)因子，其生物學(xué)功能均通過(guò)效應(yīng)細(xì)胞表面IL-4受體(IL-4R)介導(dǎo)。鑒于IL-4，IL-4R和IL-4信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中的媒介物—轉(zhuǎn)錄激活因子(STAT6)在IL-4信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中的關(guān)鍵地位，及IL-4R基因所在的16號(hào)染色體與SIgE存在相關(guān)性，IL-4R基因被列為變態(tài)反應(yīng)性疾病的重要候選基因。在它們的基因編碼區(qū)段存在多個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，近年來(lái)許多國(guó)內(nèi)外的研究表其中某些位點(diǎn)的多態(tài)性與變應(yīng)性疾病相關(guān)。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)IL-4R基因多態(tài)性與A

3、R關(guān)系和不同基因型對(duì)TIgE影響的研究較少，其結(jié)果也存在較大爭(zhēng)議，而且對(duì)不同地區(qū)，不同種族病人的研究結(jié)果亦有較大差別，本研究擬探討IL-4R基因中I50V，Q576R和S761P三種基因多態(tài)性在AR組病人中的分布，同時(shí)結(jié)合TIgE的檢查，研究IL-4R基因多態(tài)性與TIgE之間的相互關(guān)系，對(duì)IL-4R基因多態(tài)性與AR，TIgE與AR之間的關(guān)系作進(jìn)一步的探討，了解漢族人群中IL-4R基因多態(tài)性在AR人群中的分布情況，研究基因型與表型之間的內(nèi)

4、在聯(lián)系，探討AR發(fā)生的分子遺傳學(xué)機(jī)制及遺傳因素對(duì)AR的作用機(jī)理，為進(jìn)一步更好防治AR提供遺傳學(xué)線索。 材料與方法1研究對(duì)象：為廣東地區(qū)自然人群，飲食結(jié)構(gòu)相似，各研究對(duì)象之間無(wú)血緣關(guān)系。實(shí)驗(yàn)組為臨床確診的AR患者98例，并根據(jù)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分組、分型；對(duì)照組共98例，為性別、年齡與AR組匹配的門(mén)診體檢正常人。 2人外周血白細(xì)胞DNA的提?。红o脈血2ml，EDTA抗凝，采用美國(guó)Gentra公司的DNA抽提試劑盒，抽提基因組DN

5、A。 3常規(guī)空腹血樣送廣醫(yī)二院變態(tài)反應(yīng)科在UniCAP100上測(cè)定TIgE含量。 4按照參考文獻(xiàn)設(shè)計(jì)引物，分別擴(kuò)增IL-4R基因I50V，Q576R和S761P目標(biāo)基因片斷，分別用RsaI、Msp和DdeI內(nèi)切酶酶切，非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳觀察判斷相應(yīng)的基因型。 5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理。 結(jié)果：1.TIgE與AR的關(guān)系A(chǔ)R組中TIgE含量與對(duì)照組的TIgE含量有顯著性差異(

6、t=4.41，p＜0.001)，AR組中TIgE含量要明顯高于對(duì)照組。 2.I50V基因多態(tài)性與AR和TIgE的關(guān)系應(yīng)用One-wayANOVA(單因素方差分析)兩組中共196個(gè)體中I50V基因型與TIgE的關(guān)系，結(jié)果顯示各基因型之間TIgE無(wú)顯著性差異(F=0.77，P=0.46＞0.05) AR組與對(duì)照組對(duì)比，各基因型頻率均無(wú)顯著性差異(P值均大于0.05)。 AR組與對(duì)照組之間等位基因頻率不存在顯著性差異(

7、x2=0.89，P=0.35)。 3.Q576R基因多態(tài)性與AR和TIgE的關(guān)系應(yīng)用單因素方差分析兩組中共196個(gè)體中Q576R各基因型與TIgE的關(guān)系，結(jié)果顯示各基因型之間TIgE無(wú)顯著性差異(F=1.05，P=0.35＞0.05)。 運(yùn)用x2檢驗(yàn)、連續(xù)性校正等方法分析AR組與對(duì)照組的Q576R基因多態(tài)性的分布情況，結(jié)果表明在AR組中QR基因型頻率高于對(duì)照組(OR=2.28，x2=7.30，P=0.007)，QQ基因型

8、頻率低于對(duì)照組(P=0.02)。 AR組與對(duì)照組之間等位基因頻率存在顯著性差異(x2=8.58，P=0.005)，AR組的R等位基因頻率高于對(duì)照組(OR=2.08)。 4.S761P基因多態(tài)性與AR的關(guān)系P761等位基因在人群中較為少見(jiàn)，在196個(gè)體中，只有5人攜帶了一個(gè)P761等位基因，均為雜合子，不存在P761等位基因的純合子。實(shí)驗(yàn)組中的P等位基因頻率只有1.50％，對(duì)照組中的頻率為1.02％。在AR組與對(duì)照組之間的

9、等位基因型與等位基因頻率沒(méi)有顯著性的差異(P值≈1)。 結(jié)論：變應(yīng)性鼻炎患者的TIgE含量要高于正常人。 I50V基因的各基因型的TIgE無(wú)顯著性差異，I50V基因多態(tài)性與AR無(wú)明顯的相關(guān)性。AR組與對(duì)照組之間等位基因頻率不存在顯著差異。 Q576R基因的各基因型的TIgE水平無(wú)顯著性差異，Q576R基因多態(tài)性與AR存在相關(guān)性，AR組中QR基因型頻率高于對(duì)照組；AR組與對(duì)照組之間等位基因頻率存在顯著性差異，AR組