預構復合肌骨組織瓣修復肢體嚴重損傷的動物模型與實驗研究.pdf

1、目的： 肢體的嚴重損傷所合并的各類組織缺損是臨床解決的重點難題，肢體復合組織缺損的修復十分困難，尤其是按臨床需要構建一個與缺損組織相類似的復合組織是須解決的課題。預構復合組織瓣是一種按一定的需要和設想，經(jīng)過設計，不受血管分布區(qū)的限制的組織瓣：通過手術的方法將知名的血管或含知名血管的筋膜、肌肉等組織移植于沒有軸型血管的供區(qū)的某一層次，或?qū)秃霞」墙M織瓣移植于含有知名血管束的組織上，經(jīng)過一段時間的重新血管化后，將非軸型組織瓣供區(qū)人為

2、地轉化為軸型組織瓣，成為具有一定功能、要求和特性的復合組織瓣，再按軸型血管組織瓣移植，使其更便于損傷組織的修復，更完美地恢復患者的功能與外形。為治療四肢嚴重損傷所并發(fā)組織缺損，本實驗設計了含肌肉、血管、神經(jīng)、骨骼、骨膜的預構復合組織瓣的動物模型，并進行異位移植，修復肢體肌骨組織缺損材料和方法： 實驗動物：實驗用健康新西蘭大耳白兔，共24只，雌雄不限，2～3月齡；體重2.5～3.0kg。按擬移植物，隨機分為3組：A組：10只，擬植

3、入預構復合肌骨組織瓣；B組：10只，擬植游離骨塊；C組：4只，單純制造前肢骨、軟組織缺損，以做對照。 麻醉方法：動物用3％戊巴比妥鈉按1ml/kg經(jīng)兔的耳緣靜脈實施麻醉，術中及術后注意觀察兔子的呼吸頻率和幅度。 手術方法；A組第一次手術：麻醉后，下腹部、腹股溝及后肢內(nèi)側區(qū)脫毛劑備皮；碘伏消毒術區(qū)，隨機取后肢內(nèi)側行弧形切口至膝關節(jié)處。顯露股內(nèi)側肌群和股外側肌群前內(nèi)側，切開股內(nèi)側肌即可直視股骨，自腹股溝開始，于屈肌肌群之間，

4、分離出股動靜脈、股神經(jīng)；繼續(xù)分離股動靜脈，直至找到至股內(nèi)側肌中下三分之一段的分支血管，多可見動靜脈伴行的骨神經(jīng)分支，分離肌肉，自股骨中下三分之一處鋸取長1cm的股骨(為方便鋸取股骨，可于股直肌止點處切斷股直肌，上翻，截骨后縫合)，于屈肌間分離出血管蒂。取肌骨瓣后，股骨缺損處以合適長度、直徑克氏針插入髓腔，充當髓內(nèi)針固定。如血管蒂過短或位置不合適，應斷蒂與管徑相仿股動靜脈分支吻合。向上翻轉肌骨瓣，置于鹽水紗布上，觀察5～15分鐘；硅膠片包

5、裹后，將肌骨瓣向下方移位，置于深淺兩層屈肌肌群之間預構，肌骨瓣末端與深筋膜縫合固定，切口皮膚對合縫合，肌肉不縫合。刀口以慶大霉素濕敷，多層無菌紗布包扎。 A組第二次手術：在第1次手術后7～14天后，行第2次手術。沿原切口進入，逐層分離，小心顯露預構肌骨復合瓣，然后斷蒂、修整后異位移植于兔前肢預制的橈骨肌骨缺損處，同時將預構瓣內(nèi)血管、神經(jīng)與前肢血管、神經(jīng)吻合，吻合后繼續(xù)觀察5～15分鐘?？p合后以1cm×10cm木板充當小夾板固定患

6、肢。斷蒂前隨機選取兩只兔子行血管染色，觀察預構瓣血運。 B組：隨機選取兔前肢，脫毛劑備皮、消毒，于兔前臂橈骨側中上三分之一處鋸下長1cm橈骨，去除骨膜，生理鹽水浸泡后回植回原處，以7＃絲線捆扎于尺骨固定，縫合，包扎。 C組：單純鋸除1cm橈骨，適量切除肌肉，制造四肢骨質(zhì)缺損動物模型，作為對照。 觀察方法：直接觀察：在第1次手術后7～14天后，行第2次手術。取原切口，在肌肉間仔細分離、顯露植入組織瓣的起始段和植入端

7、。將此預構瓣掀起展平放置于生理濕紗布上，觀察10～20分鐘。 血管染色觀察：實驗組中隨機選出2只行血管染色，顯微鏡鏡下觀察肌肉、血管、骨塊的著色情況。 影像學檢查：移植術后2周、4周、8周、12周，將動物捆綁或處死(第12周)后進行撓骨正位X線拍片，記錄骨缺損生長情況。 組織學檢查：移植術后4周、8周、12周隨機分批處死新西蘭兔，行影像學檢查后，分別取骨缺損斷端骨質(zhì)標本和軟組織標本，切片觀察。結果； A組

8、異位移植后有2例失敗，其余均異位移植成功。影像學、組織學觀察以及影像學檢查結果進行Lane-Sandhu組織學評分，進行統(tǒng)計學比較，證明A組骨痂出現(xiàn)時間，斷端皮質(zhì)橋接時間，骨髓腔出現(xiàn)時間，均早于B組；A組成骨細胞、新生骨細胞數(shù)量和出現(xiàn)骨島的數(shù)量多于同期B組。8周、12周A、B組X線檢查結果Lane-Sandhu組織學評分結果經(jīng)統(tǒng)計學方法分析具有顯著性差異。 結論： 本次實驗建立了肢體損傷的兔模型，并在此模型上完成了預構復

9、合肌骨組織瓣的建立、移位并獲得存活。此動物實驗證明了攜帶神經(jīng)、血管束、肌肉、骨膜、骨骼的預構復合組織瓣的可行性。預構復合肌骨組織瓣異位移植于兔橈骨骨缺損處，影像學、組織學、統(tǒng)計結果證明其加速組織缺損的修復再生，縮短骨缺損愈合時聞。預構復合組織瓣位置較隱蔽，預構的組織瓣具有骨質(zhì)支撐作用，組織瓣蒂耐扭曲及牽拉。預構血管的管徑可選擇相對比較大的，可以提高組織瓣移轉時血管吻合的成功率。預構組織瓣可不受正常血管供區(qū)的限制，按需要構制復合肌骨組織瓣