p21和p27基因多態(tài)性與非小細(xì)胞肺癌的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：腫瘤的發(fā)生是個(gè)體遺傳因素與外界環(huán)境因素綜合作用的結(jié)果。p21基因和p27基因是調(diào)控細(xì)胞周期的相關(guān)基因，同屬于細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制因子的cip/kip家族，對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)行負(fù)調(diào)控，二者功能失?？梢允蛊鋵?duì)細(xì)胞周期的抑制作用減弱，從而導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)活躍甚至失控發(fā)生惡性變。因此被認(rèn)為是新的抑癌基因侯選者。p21、p27基因存在幾種單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotidepolymorphism，SNP)，這些SNPs可能影響其基

2、因的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平，從而導(dǎo)致人體對(duì)某些腫瘤的易感性發(fā)生變化。本實(shí)驗(yàn)研究的目的是探討p21基因外顯子3的3'非翻譯區(qū)(3'-untranslatedregion，3'UTR)第20堿基對(duì)的SNP(核苷酸出現(xiàn)C→T突變)以及p27基因第109密碼子的SNP(核苷酸出現(xiàn)T→G突變導(dǎo)致相應(yīng)氨基酸出現(xiàn)纈氨酸→甘氨酸替代，即V109G多態(tài)性)與中國(guó)北方人群非小細(xì)胞肺癌(Non-smallcelllungcarcinoma，NSCLC)遺傳易

3、感性及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 方法：本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象分為NSCLC病例組和健康對(duì)照組。病例組選取2002年1月至2004年1月在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院胸外科住院手術(shù)治療或行支氣管鏡檢查，經(jīng)病理組織學(xué)確診的NSCLC患者共202例。其中，男156例，女46例，年齡28-75歲，平均56.8歲。對(duì)照組選取同期在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院進(jìn)行健康體檢或者河北省血站獻(xiàn)血員共265血站獻(xiàn)血員共265例，其中男198例，女67例，年齡21-72歲，平均5

4、4.9歲。所有研究對(duì)象均抽取外周靜脈抗凝血5ml，應(yīng)用蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取白細(xì)胞DNA，應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism，PCR-RFLP)方法，分析NSCLC病例組和健康對(duì)照組p21、p27基因SNP位點(diǎn)的基因型。應(yīng)用SPSS11.5進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。比較基因型和等位基因型分布用卡方檢驗(yàn)，比

5、較發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的比值比(oddsratio，OR)和95％可信區(qū)間(confidenceinterval，CI)用非條件Logistic回歸分析。 結(jié)果：p21和p27的基因型分布在NSCLC病例組和健康對(duì)照組均符合Hardy-Weinberg平衡(P＜0.05)。 p21等位基因和基因型總體分布在NSCLC病例組和健康對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P＜0.05)。但p21基因3'UTR突變型(C/T+T/T)頻率在NSCLC病例組(

6、72.8％)顯著高于健康對(duì)照組(63.8％)(χ2=4.24，P=0.039)。與C/C基因型相比，攜帶T/T和C/T基因型可顯著增加這一人群NSCLC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(經(jīng)性別、年齡校正的OR=1.54，95％CI=1.03-2.30)。 根據(jù)吸煙狀況分層分析發(fā)現(xiàn)，不吸煙NSCLC病例組p21基因T等位基因頻率(49.3％)顯著高于不吸煙健康對(duì)照組(38.0％)(χ2=4.81，P=0.028)。p21基因型總體分布在不吸煙NSCLC病

7、例組與不吸煙健康對(duì)照組有顯著性差異(χ2=7.88，df=2，P=0.019)。p21基因突變型(C/T+T/T)頻率在不吸煙NSCLC病例組(81.6％)顯著高于不吸煙健康對(duì)照組(62.5％)(χ2=7.88，P=0.005)。與C/C基因型相比，攜帶C/T和T/T基因型可顯著增高不吸煙者的NSCLC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(經(jīng)性別、年齡校正的OR=2.78，95％C1=1.38-5.63)。在吸煙組則未見(jiàn)這種差異(P＜0.05)。 按組織學(xué)

8、類型分層分析發(fā)現(xiàn)，p21基因T等位基因頻率在肺鱗癌組、肺腺癌組與健康對(duì)照組相比均無(wú)顯著性差異(P＜0.05)。與C/C基因型相比，攜帶C/T和T/T基因型并不增加這一人群的肺鱗癌或肺腺癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。 在對(duì)性別的分層分析中發(fā)現(xiàn)，在女性組，p21基因T等位基因頻率在病例組(47.8％)明顯高于健康對(duì)照組(33.6％)(χ2=4.64，P=0.031)。p21基因T/T型頻率在病例組(19.6％)明顯高于對(duì)照組(7.5％)，C/C型頻

9、率在病例組(23.9％)則明顯低于對(duì)照組(40.3％)(χ2=5.40，P=0.020)。攜帶T/T基因型較之C/C型能顯著增加女性人群NSCLC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(經(jīng)年齡校正的OR=4.83，95％CI=1.26-18.62)。在男性組則未見(jiàn)這種差異。 根據(jù)年齡進(jìn)行的分層分析顯示，在≥50歲年齡組，p21基因突變型頻率在NSCLC病例組(73.1％)明顯高于健康對(duì)照組(61.0％)(χ2=5.80，P=0.016)。攜帶C/T、T/T基

10、因型較C/C基因型能顯著增加50歲以上人群NSCLC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(經(jīng)性別、年齡校正的OR=1.72，95％CI=1.09-2.71)。 根據(jù)有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行的分層分析未發(fā)現(xiàn)p21基因型分布在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的差異(P＜0.05)，因此p21多態(tài)性與NSCLC患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能無(wú)關(guān)。 p27等位基因和基因型總體分布在NSCLC病例組和健康對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P＜0.05)。根據(jù)吸煙狀況、病理類型、性別、年齡以及

11、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況對(duì)p27基因V109G多態(tài)性的分層分析也未顯示出p27等位基因頻率及基因型總體分布的差異，因此，不能認(rèn)為該多態(tài)性與NSCLC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。 結(jié)論：p21基因3'UTRSNP與中國(guó)北方人群NSCLC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)，C/T、T/T基因型可能增加NSCLC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，尤其對(duì)于不吸煙個(gè)體、女性及50歲以上者其可能是NSCLC的發(fā)病危險(xiǎn)因素，而與病理類型及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)關(guān)。p27基因V109GSNP與中國(guó)北方人群NSCLC遺傳易感