致病性嗜水氣單胞菌檢測試劑盒的研制.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、根據(jù)嗜水氣單胞菌16srDNA和氣溶素序列設計引物，建立雙重PCR檢測體系。用該方法對本實驗室保存的23株嗜水氣單胞菌進行檢測，與脫脂奶平板檢測結果的符合率為100％。
　　 在雙重PCR基礎上，增加嗜水氣單胞菌絲氨酸胞外蛋白酶和彈性胞外蛋白酶的引物，建立和優(yōu)化嗜水氣單胞菌的多重PCR檢測體系。結果表明已建立的雙重PCR檢測體系能夠覆蓋嗜水氣單胞菌多重PCR的檢測結果，可準確、快速、穩(wěn)定地鑒別致病性嗜水氣單胞菌。
　　

2、根據(jù)以上結果，組裝致病性嗜水氣單胞菌雙重PCR檢測試劑盒，并起草《嗜水氣單胞菌PCR檢測試劑盒檢驗檢疫規(guī)程》。用該試劑盒檢測了從南京地區(qū)衛(wèi)崗，小衛(wèi)街等四處農(nóng)貿(mào)市場的的200份魚樣和從常熟、興化、臨沂、贛榆、鄭州、南京等六個市區(qū)多個規(guī)模化漁場收集的水樣和病料，從中共檢測出8株嗜水氣單胞菌，其中4株為致病性嗜水氣單胞菌。
　　 參照GB/T186522-2002致病性嗜水氣單胞菌檢驗方法，用J-1株胞外蛋白酶EPR2-3重組蛋白高免

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