Graves病證候與基因多態(tài)性的相關(guān)研究.pdf

1、目的：
　　 彌漫性毒性甲狀腺腫(Graves病，簡稱GD)是臨床常見的內(nèi)分泌疾病之一，約占所有甲亢的80％～85％。大量的流行病學(xué)證據(jù)表明遺傳因素在GD的發(fā)病中起重要作用。單核苷酸多態(tài)性(SNP)占人類可遺傳變異的90％以上，是目前詮釋疾病遺傳易感性最好的遺傳標(biāo)記，可用于疾病診斷、預(yù)后等風(fēng)險的定量預(yù)測。本研究應(yīng)用分子遺傳學(xué)方法，選取已獲得的GD易感基因進行SNP分析，探討與GD證候、轉(zhuǎn)歸的關(guān)系及復(fù)方甲亢片對易感基因的影響。

2、r>　　 方法：
　　 對國內(nèi)外文獻數(shù)據(jù)庫進行檢索，建立易感基因數(shù)據(jù)樣本，篩選與GD發(fā)生機制有關(guān)的SNP位點。采用血液基因組DNA試劑盒提取EDTA抗凝血獲得DNA。使用引物延伸法的微測序技術(shù)與基于基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(Matrix Assisted Laser Desorption/ionisation Time ofFlight Mass Spectrometry，MALDI-TOF MS)的實驗平臺進行SNP

3、分型檢測。將研究對象按照證候、轉(zhuǎn)歸及藥物進行分組，采用二元及多項Logistic回歸分析和對數(shù)線性模型統(tǒng)計分析相關(guān)數(shù)據(jù)。
　　 結(jié)果：
　　 1、篩選出位于不同染色體上8個基因(CTLA4、CD40、TNF、IFIH1、TSHR、Tg、PTPN22、ADRB2)的8個多態(tài)性位點(rs231775、rs1883832、rs1800629、rs1990760、rs2268458、rs2076740、rs2476601、rs1

4、042714)進行研究；
　　 2、本研究中CTLA4(rs231775)、CD40(rs1883832)、TNF(rs1800629)、IFIH1(rs1990760)、TSHR(rs2268458)等5個基因的位點存在多態(tài)性，PTPN22基因(rs2476601)位點未發(fā)現(xiàn)多態(tài)性存在，Tg(rs2268458)、ADRB2(rs1042714)因檢測中出現(xiàn)假陽性結(jié)果而被剔除；
　　 3、共有120例患者進入證型研究，

5、其中氣陰兩虛證87例(72.50％)、肝郁火旺證18例(15.00％)、其它證型15例(12.50％)。使用氣陰兩虛證和肝郁火旺證分組進行對照分析，兩組間平均年齡氣陰兩虛證組(35.66±13.79歲)大于肝郁火旺組(28.44±10.73歲)，有統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.088，P=0.039)。兩組間性別無統(tǒng)計學(xué)意義。使用多元logistic回歸對兩組病例的基因型和等位基因進行分析，氣陰兩虛證與CTLA4(rs231775)位點的GG基因

6、型(OR=0.18，P=0.03)和G(OR=0.19，P=0.04)等位基因存在關(guān)聯(lián)，肝郁火旺證與TNF(rs1800629)位點的GG基因型(P=0.00)和TSHR(rs2268458)位點的CC基因型(OR=8.36，P=0.04)存在關(guān)聯(lián)，均有統(tǒng)計學(xué)意義；
　　 4、將87例氣陰兩虛證患者分成治愈和復(fù)發(fā)兩組，兩組間性別、年齡、病情分級均無統(tǒng)計學(xué)差異，使用二元logitic回歸對氣陰兩虛證病例進行分析發(fā)現(xiàn)CTLA4(rs

7、231775)位點的GG基因型(OR=3.46，P=0.02)與復(fù)發(fā)有關(guān)，具有統(tǒng)計學(xué)意義；
　　 5、針對CTLA4基因的GG基因型納入藥物、轉(zhuǎn)歸因子進行三因素的對數(shù)線性模型進行分析，均無統(tǒng)計學(xué)差異，提示復(fù)方甲亢片對該基因位點無影響。
　　 結(jié)論：
　　 根據(jù)上述研究結(jié)果得出結(jié)論如下：
　　 1、遺傳因素在GD的發(fā)生中起重要作用，其遺傳易感性可能由多個外顯率不同的基因所決定；
　　 2、TNF基因