阿托伐他汀鈣對乙醇所致H9C2心肌細胞氧化應激損傷的保護作用.pdf

1、目的：
　　觀察H9C2心肌細胞在乙醇所致的氧化應激損傷以及阿托伐他汀鈣對乙醇所致的H9C2心肌細胞氧化應激損傷的保護作用。
　　方法：
　　常規(guī)方法培養(yǎng)H9C2心肌細胞，在培養(yǎng)24h后隨機分組:正常對照組（Control組）、200mmol/L乙醇組（alcohol組）、10-7mol/L阿托伐他汀鈣預處理組，10-6mol/L阿托伐他汀鈣預處理組，10-5mol/L阿托伐他汀鈣預處理組，用MTT法檢測乙醇所致的氧化

2、應激損傷心肌細胞存活率的影響以及經(jīng)阿托伐他汀鈣干預對心肌細胞存活率的影響;LDH、MDA、SOD試劑盒檢測乙醇所致的H9C2心肌細胞氧化應激損傷細胞及阿托伐他汀鈣對心肌細胞的保護作用。ROS檢測阿托伐他汀鈣的保護作用。
　　結果：
　　1、細胞存活率:不同濃度的乙醇對H9c2細胞存活率的影響與乙醇濃度有直接相關性，隨著乙醇濃度的升高H9c2細胞存活率呈逐漸下降趨勢。高濃度的阿托伐他汀鈣(10-4 mol/L)處理H9c2細胞

3、48小時的存活率為88.59％較對照組細胞存活率明顯降低(P＜0.01)，出現(xiàn)增殖抑制效應，阿托伐他汀鈣終濃度為10-7mol/L～10-5mol/L時存活率為100.87±4.30％、95.03±10.23％、101.60±8.94％，與對照組相比對細胞存活率無影響。10-8mol/L～10-5mol/L阿托伐他汀鈣預處理24小時之后再加入乙醇處理24小時的H9c2細胞的存活率分別為56.38±5.63％，64.91±6.64％，73

4、.77±7.34％和90.69±8.66％，隨著阿托伐他汀鈣濃度的增加細胞存活率明顯升高。
　　2、乙醇組在乙醇作用后H9c2細胞受到損傷，LDH較對照組明顯增高，損傷后MDA亦較對照組明顯增高，SOD較對照組明顯降低。不同濃度阿托伐他汀鈣(10-7～10-5 mol/L)預處理24h后培養(yǎng)細胞，在乙醇損傷過程中，均較乙醇組細胞損傷小，表現(xiàn)為反映細胞損傷的指標LDH分別為198.25±15.02U/L，166.06±17.32U/

5、L，112.67±16.88U/L;脂質過氧化產(chǎn)物MDA含量分別為1.88.±0.09nmol/mg protein,1.67±0.13nmol/mg protein,1.19nmol/mgprotein;而起保護作用的SOD則較乙醇組明顯增加，分別為35.43.±3.04/mgprotein,42.67±4.22U/mg protein,51.42±4.93U/mg protein。
　　3、ROS活性:正常細胞負載DCF后在細

6、胞內呈明亮的綠色熒光，其熒光強弱可反映ROS的變化。觀察發(fā)現(xiàn)經(jīng)乙醇處理24h后，細胞內熒光強度最強，用不同濃度阿托伐他汀鈣(10-7～10-5mol/L)預處理24h后，與乙醇組相比細胞內熒光強度分別下降。
　　結論：
　　本研究通過檢測LDH、MDA、SOD和ROS水平的變化可以驗證乙醇可對心肌細胞造成氧化應激損傷，而阿托伐他汀鈣對乙醇所致H9c2細胞的氧化應激損傷具有劑量依賴性保護作用。表明阿托伐他汀鈣具有抗氧化作用，減