NAC對(duì)高糖致大鼠腹膜間皮細(xì)胞NOX2與Trx-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的：1、觀察尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2（NOX2）與硫氧還蛋白-1（Trx-1）在高糖作用下腹膜間皮細(xì)胞中的表達(dá)并探討其意義；2、觀察N-乙酰半胱氨酸（NAC）對(duì)NOX2與Trx-1因子表達(dá)的影響，研究其對(duì)延緩腹膜纖維化發(fā)生的可能的調(diào)節(jié)機(jī)制。
　　方法:30只健康雄性SD大鼠，體重250±30g，按隨機(jī)分組法分成3組，每組10只。對(duì)照組（NS組）：每只大鼠每天一次腹腔注射生理鹽水25ml，28天后，每天一次用生理鹽水5m

2、l灌胃，一共灌胃8周。高糖模型組（HGC組）：每只大鼠每天一次注射4.25％的葡萄糖腹透液25ml，脂多糖（LPS）用4．25％葡萄糖腹透液稀釋為6mg/L，在第8、10、12、22、24、26天腹腔注射LPS(0．6mg/kg體重)，建立腹膜纖維化模型，28天后，每天一次用生理鹽水5ml灌胃，一共灌胃8周。N-乙酰半胱氨酸治療組（NAC組）：在上述腹膜纖維化模型基礎(chǔ)上，加用（N-乙酰半胱氨酸+生理鹽水）混懸液5ml(100mg/kg/

3、d)每天一次口服灌胃，一共灌胃8周。常規(guī)飼養(yǎng)SD大鼠，實(shí)驗(yàn)周期12周。于實(shí)驗(yàn)最后1天斷頭法處死所有大鼠，取腹膜組織行HE染色病理學(xué)檢查及免疫組化檢測(cè)壁層腹膜組織細(xì)胞 NOX2與硫氧還蛋白-1（Trx-1）的表達(dá)。
　　結(jié)果：①各組大鼠壁層腹膜組織形態(tài)學(xué)變化（HE染色）：光鏡下，NS組腹膜規(guī)律覆蓋間皮細(xì)胞，其下為少量纖維結(jié)締組織，基質(zhì)很薄，無(wú)明顯損傷，腹膜結(jié)構(gòu)較完整。HGC組和NAC組可見(jiàn)間皮細(xì)胞脫落，間皮下結(jié)締組織增厚，可見(jiàn)部分成

4、纖維樣細(xì)胞及單核巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)且有纖維素樣物質(zhì)沉積，且腹膜組織新生小血管也有增多，HGC組的上述現(xiàn)象較為明顯。②各組大鼠腹膜組織中NOX2、Trx-1的免疫組化結(jié)果及圖像分析：1）免疫組化染色結(jié)果：NS組NOX2、Trx-1幾乎不表達(dá)，HGC組及NAC組NOX2、Trx-1在間皮細(xì)胞的胞漿和胞核都有陽(yáng)性表達(dá),背景幾乎沒(méi)有顏色或呈淺棕色，陽(yáng)性產(chǎn)物為深淺不等、形狀不規(guī)則棕色顆粒，尤以HGC組明顯。2）圖像分析：經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，各組NOX2、Tr