SOX7和SOX17基因啟動子異常甲基化在骨髓增生異常綜合征中的預后價值研究.pdf

1、復旦大學碩士研究生畢業(yè)論文SOX7和SOX17基因啟動子異常甲基化在骨髓增生異常綜合征中的預后價值研宄院系：華山醫(yī)院血液科研究生：樊榮導師：王小欽教授導師組成員：陳波斌副教授許小平教授林果為教授復旦大學附屬華山醫(yī)院二零一二年四月復旦大學碩士學位論文中文摘要SOX7和SOX17基因啟動子異常甲基化在骨髓增生異常綜合征中的預后價值研宄中文摘要第一部分S0X7和S0X17基因啟動子異常甲基化抑制白血病細胞株中S0X7和S0X17基因表達目的：

2、在急性髓系白血病細胞株THP1和骨髓增生異常綜合征（MDS)轉白細胞株SKM1中，探討去甲基化藥物5氮雜2脫氧胞苷（DAC)處理對S0X7和SOX17基因表達和細胞增殖的影響；檢測S0X7和SOX17基因在細胞株中甲基化狀態(tài)，同時對甲基化PCR(MSP)技術的正確性進行驗證。方法：使用2、4和8nmolLDAC處理細胞株（THP1和SKM1)，在24h、48h和96h三個時間點觀察SOX7和S0X17基因表達變化。使用CCK8法檢測4|

3、imolLDAC藥物濃度對細胞增殖的影響。采用MSP的方法檢測細胞株S0X7和S0X17DNA甲基化狀態(tài)，并用亞硫酸鹽測序驗證MSP技術的結果。結果：SOX7和S0X17基因在THP1和SKM1細胞株中均有表達，使用DAC處理后S0X7和S0X17基因mRNA表達均被上調（P0.05)，并有濃度梯度和時間梯度效應，且THPI細胞株S0X7和S0X17基因表達上調幅度較SKM1高。4nmolLDAC處理細胞后，發(fā)現(xiàn)細胞增殖減慢（P0.05

4、)，THP1較SKM1對藥物反應敏感。MSP結果發(fā)現(xiàn)，S0X7和S0X17基因甲基化DNA存在于THP1和SKM1細胞株中，亞硫酸鹽測序驗證結果與MSP結果一致。結論：THP1和SKM1細胞株中存在S0X7和SOX17基因的異常甲基化，基因表達水平在DAC處理后上調。亞硫酸鹽測驗驗證了MSP試驗的正確性，表明可以使用該方法進行大批量臨床標本S0X7和S0X17基因甲基化檢測。關鍵詞：THP1細胞株；SKM1細胞株；S0X7基因；S0X1