懷牛膝細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及細(xì)胞中多糖含量的調(diào)控.pdf_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩78頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、本文首次對(duì)懷牛膝的細(xì)胞懸浮培養(yǎng)及細(xì)胞中多糖含量的調(diào)控進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。結(jié)果表明:(1)通過(guò)懷牛膝種子形成的試管苗可以通過(guò)腋生枝型和多芽體發(fā)生型兩條途徑進(jìn)行繁殖,適宜的培養(yǎng)基分別為MS+0.01 mg·L<'-1>NAA+0.5 mg·L<'-1>6-BA和MS+0.01 mg·L<'-1>TDZ;適宜于試管苗生根的培養(yǎng)基為MS+0.05mg·L<'-1>NAA+1 mg·L<'-1>PP<,333>;(2)試管苗的葉片在B<,5>+2

2、mg·L<'-1>2,4-D+0.5 mg·L<'-1>6-BA+30g/L葡萄糖+1g/LCH的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)形成的愈傷組織,經(jīng)過(guò)3-5次繼代后可以得到四種不同類型的愈傷組織,選擇淡黃色,小顆粒,結(jié)構(gòu)疏松,生長(zhǎng)迅速的愈傷組織(Ⅰ型)可以建立細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系;(3)細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線呈“S”型,可分為延遲期(0-6 d)、指數(shù)生長(zhǎng)期(6-15 d)和緩慢生長(zhǎng)期(15-21 d)三個(gè)階段;多糖含量在6 d時(shí)達(dá)到第一個(gè)高峰后即呈現(xiàn)下降趨勢(shì),在15

3、d時(shí)達(dá)到第二個(gè)高峰(比第一個(gè)峰值低);可溶性蛋白質(zhì)含量在9 d時(shí)達(dá)到峰值,比細(xì)胞生長(zhǎng)高峰提前6 d,之后呈下降趨勢(shì),15 d以后基本穩(wěn)定;POD活性3-6 d呈小幅增長(zhǎng),經(jīng)短暫的平穩(wěn)期后于9 d時(shí)開(kāi)始迅速上升,15 d時(shí)達(dá)到高峰,之后持續(xù)下降,在一定程度上可以反映細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況;SOD活性在12 d時(shí)達(dá)到峰值,比POD活性峰早,之后下降并維持在一定的水平;懸浮培養(yǎng)液的pH值先下降后趨于平緩,維持在3.7-3.9之間,最終又回復(fù)到初始水平

4、,反映細(xì)胞適宜在酸性環(huán)境中生長(zhǎng),同時(shí)具有自我調(diào)節(jié)pH的能力;培養(yǎng)液的電導(dǎo)率在0-12 d一直呈下降趨勢(shì),在12 d時(shí)降至最低點(diǎn),隨即有所回升,后漸趨于平緩,與細(xì)胞生長(zhǎng)呈現(xiàn)一定的相關(guān)性;(4)LS+30g/L蔗糖+0.5 mg·L<'-1>6-BA+0.5g/LCH培養(yǎng)基有利于懷牛膝細(xì)胞中多糖含量的提高,50g/L的接種量、14 d的繼代周期,60 mol/LNO<,3><'->的單一氮源、45g/L的混合碳源(蔗糖:葡萄糖為1:1)、p

5、H值5-6、光照培養(yǎng)以及較大的培養(yǎng)瓶體積都可以使細(xì)胞保持良好的生長(zhǎng)狀態(tài)和多糖合成能力;(5)采用食用菌類榆黃蘑作為真菌誘導(dǎo)子,在培養(yǎng)9 d時(shí)添加5 mgGE·L<'-1>,收獲時(shí)細(xì)胞中多糖含量可以達(dá)到6.56 nag·g<'-1>,但對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響較大,最終細(xì)胞干重較??;在培養(yǎng)12 d時(shí)添加2.5%(v/v)的酵母誘導(dǎo)子,細(xì)胞干重最大,可達(dá)46.75g/L,多糖含量?jī)H次于前者;添加50μmol/LCu<'2+>,細(xì)胞干重和多糖含量都次于

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論