Caveolin-1在子宮頸癌及上皮內(nèi)瘤變中的表達(dá)及其與VEGF關(guān)系.pdf

1、[研究背景與目的]
　　 宮頸癌是最常見的女性惡性腫瘤之一，在一些發(fā)展中國家其發(fā)病率居第一位。近些年隨著普查普治工作的開展，我國宮頸癌的死亡率明顯下降，但年輕婦女宮頸癌的發(fā)病率有上升的趨勢，給家庭和社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。隨著現(xiàn)代細(xì)胞和分子生物學(xué)的進(jìn)展，人們認(rèn)識(shí)到宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)多階段、多步驟的復(fù)雜過程，涉及到許多腫瘤相關(guān)分子。
　　 Caveolae是近年發(fā)現(xiàn)的一個(gè)候選抑癌基因，其編碼的Caveolin-1是細(xì)胞

2、膜上的一種支架蛋白。Caveolin-1是一種候選抑癌基因，參與調(diào)控腫瘤細(xì)胞增殖、粘附、侵襲轉(zhuǎn)移及凋亡。Caveolin-1基因在多種腫瘤中（如肝癌、卵巢癌、乳腺癌、胃腺癌等）出現(xiàn)缺失或斷裂，提示Caveolin-1與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。caveolin-1在卵巢癌組織中表達(dá)明顯降低，且隨細(xì)胞分化程度降低而減少，隨臨床分期的增加而降低。Caveolin-1作為前列腺癌一種新的腫瘤標(biāo)志物，可以進(jìn)行早期診斷及預(yù)后判斷價(jià)值，為前列腺癌早發(fā)

3、現(xiàn)、早治療提供新途徑。腎細(xì)胞癌中Caveolin-1的表達(dá)高低與生存預(yù)后有明顯的相關(guān)性，其表達(dá)高，預(yù)后越差;反之，表達(dá)越低，預(yù)后越好。以上研究均表明Caveolin-1正常表達(dá)使細(xì)胞維持良性生長、分化的表型，在腫瘤惡性轉(zhuǎn)化、增殖的過程中Caveolin-1表達(dá)水平下調(diào)，可能促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。目前國內(nèi)外對(duì)Caveolin-1在腫瘤中表達(dá)存有爭議，在宮頸癌組織中的表達(dá)情況在國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道極少，僅見國內(nèi)報(bào)道Caveolin-1在

4、宮頸癌中的表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。
　　 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是一種高度特異性的血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂素，通過與其特異性受體結(jié)合，引起一系列信號(hào)傳導(dǎo)，從而發(fā)揮生物學(xué)功能。近年研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是與腫瘤血管形成有關(guān)的重要調(diào)控因子，與腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)主要作用于處于增生狀態(tài)下的血管內(nèi)皮細(xì)胞，盡管其在多種細(xì)胞中都有表達(dá)，但通常只有腫瘤細(xì)胞才能釋放。惡性

5、腫瘤發(fā)生過程中血管生成有著其重要作用，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在腫瘤血管形成中起調(diào)控作用。在宮頸癌的生長過程中，新生血管的形成發(fā)揮著重要的作用，是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的前提條件。新生血管成為腫瘤組織從宿主獲取養(yǎng)分的通路，同時(shí)腫瘤細(xì)胞通過新生血管轉(zhuǎn)達(dá)送到身體的各個(gè)部位，完成腫瘤的轉(zhuǎn)移過程。
　　 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是血管生成的強(qiáng)促進(jìn)劑，而Caveolin-1可能是血管生成促進(jìn)劑和抑制劑作用的共同靶點(diǎn)，Caveolin-1在

6、VEGF/VEGFR2調(diào)節(jié)血管生成中起關(guān)鍵作用。關(guān)于Caveolin-1、VEGF在宮頸癌組織中的表達(dá)是否具有相關(guān)性，目前國內(nèi)外仍無報(bào)道。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測Caveolin-1、VEGF在正常宮頸組織、慢性宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)及浸潤性宮頸癌(ICC)Ⅰ、Ⅱ期中的表達(dá)水平，進(jìn)一步分析浸潤性宮頸癌(ICC)Ⅰ、Ⅱ期的患者癌組織中Caveolin-1、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)水平與臨床病理

7、學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系，探討Caveolin-1與血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的關(guān)系及在宮頸癌轉(zhuǎn)移中的地位，對(duì)進(jìn)一步尋找宮頸癌早期診斷的有用的生物標(biāo)志物，進(jìn)一步了解宮頸癌惡性轉(zhuǎn)化及浸潤、轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制提供理論依據(jù)，也為宮頸癌的靶向治療提供新思路。
　　 [方法]
　　 回顧性分析2008年1月—2012年2月，南方醫(yī)科大學(xué)附屬萍鄉(xiāng)醫(yī)院婦產(chǎn)科門診就診或收住入院的宮頸疾病患者的臨床病理資料，均因?yàn)楦鞣N類型的子宮頸良惡性病變接受了相

8、應(yīng)的手術(shù)，術(shù)后石蠟包埋組織標(biāo)本保存在我院病理科，共130例。病例被分為5組:其中慢性宮頸炎組，共40例;CINⅠ/Ⅱ組，共30例，其中CINⅠ12例和CINⅡ18例;CINⅢ組，共20例;浸潤性宮頸癌組，共40例，其中包括Ⅰ期21例和Ⅱ期19例。并以同期因“子宮肌瘤”在我院需行全子宮切除術(shù)病例的正常子宮頸組織30例為對(duì)照組，通過應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法檢測正常宮頸組織、慢性宮頸炎、宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)和及浸潤性宮頸癌(ICC)Ⅰ、Ⅱ期

9、中的石蠟標(biāo)本中的Caveolin-1和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)水平。用已知結(jié)腸癌陽性標(biāo)本做陽性對(duì)照，以PBS代替一抗作陰性對(duì)照，來進(jìn)行Caveolin-1、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)免疫組織化學(xué)著色結(jié)果判定，整理數(shù)據(jù)及病理資料。利用SPSSI3.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用卡方檢驗(yàn)或Fisher確切概率法分析各指標(biāo)在宮頸不同病變組織中表達(dá)的差異性;用卡方檢驗(yàn)或Fisher確切概率法分析各指標(biāo)與宮頸癌臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性，并

10、進(jìn)一步用logistic回歸分析篩選各參數(shù)指標(biāo)與表達(dá)陽性的相關(guān)因素;各指標(biāo)相關(guān)分析采用卡方檢驗(yàn)并計(jì)算列聯(lián)系數(shù);P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 [結(jié)果]
　　 1、Caveolin-1蛋白在宮頸組織中的陽性著色定位于細(xì)胞胞膜及胞漿，其陽性表達(dá)呈棕黃色或棕褐色顆粒。Caveolin-1蛋白在正常宮頸組織、慢性宮頸炎、CINⅠ/Ⅱ、CINⅢ及浸潤性宮頸癌組織中的陽性表達(dá)率呈漸進(jìn)性降低，分別為100.00％(30/30)、95

11、％(38/40)、83.33％(25/30)、75.00％(15/20)和72.50％(29/40)，五組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);正常宮頸組織組、慢性宮頸炎組、CINⅠ/Ⅱ組、CINⅢ組與浸潤性宮頸癌組織組之間兩兩比較，正常宮頸組織組與浸潤性宮頸癌組比較有顯著性差異(P＜0.0125)，其余各組之間無明顯差異(P＞0.0125)（見表3.1）;宮頸癌中Caveolin-1蛋白表達(dá)與年齡、FIGO臨床分期無相關(guān)，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

12、(P＞0.05)(見表3.2);Caveolin-1蛋白的表達(dá)與腫瘤大小、病理分級(jí)、浸潤深度、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均相關(guān)(P＜0.05)（見表3.2），再進(jìn)一步經(jīng)Logistic逐步回歸分析得出，Caveolin-1蛋白的表達(dá)與腫瘤大小、浸潤深度、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均相關(guān)，其中腫瘤越大，蛋白陽性表達(dá)越低(OR=0.052，P＜0.05);腫瘤侵犯越深，蛋白陽性表達(dá)越低(OR=0.044，P＜0.05);有淋巴轉(zhuǎn)移者的表達(dá)低于無淋巴轉(zhuǎn)移者（OR=0

13、.037，P＜0.05）（見附表3.2）。
　　 2、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在宮頸組織中的陽性著色主要定位于胞漿，其陽性表達(dá)呈棕黃色或棕褐色顆粒，表達(dá)陽性細(xì)胞的分布呈局灶性和彌漫性。VEGF蛋白在正常宮頸組織、慢性宮頸炎、CINⅠ/Ⅱ、CINⅢ及浸潤性宮頸癌組織中的陽性表達(dá)率呈漸進(jìn)性增高，分別為10.00％(3/30)、15.00％(6/40)、26.67％(8/30)、45.00％(9/20)和70.00％(28/40)

14、，五組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，正常宮頸組織、慢性宮頸炎、CINⅠ/Ⅱ、CINⅢ與浸潤性宮頸癌組織之間兩兩比較，CINⅢ與浸潤性宮頸癌組之間其表達(dá)無差異(P＞0.0125)，其余各組與浸潤性宮頸癌組之間有明顯差異(P＜0.0125)（見表3.3）;浸潤性宮頸癌中VEGF蛋白表達(dá)與腫瘤大小、年齡、FIGO臨床分期無相關(guān)，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)(見表3.4);VEGF蛋白的表達(dá)與病理分級(jí)、浸潤深度、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)

15、(P＜0.05)（見表3.4），再進(jìn)一步經(jīng)Logistic逐步回歸分析得出，VEGF蛋白表達(dá)與病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，病理分級(jí)越高，蛋白陽性表達(dá)越低(OR=0.156P＜0.05);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的表達(dá)高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(OR=0.024，P＜0.05)。（見附表3.4）
　　 3、浸潤性宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變Ⅲ級(jí)中Caveolin-1蛋白與VEGF蛋白表達(dá)之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P＜0.05)(表3.5);CINⅢ中Caveoli

16、n-1蛋白與VEGF蛋白表達(dá)兩者之間呈負(fù)相關(guān)的關(guān)系(P＜0.05)(表3.6);CINⅠ/Ⅱ組中Caveolin-1蛋白與VEGF蛋白表達(dá)兩者之間無相關(guān)(P＞0.05)（表3.7）;慢性宮頸炎組中Caveolin-1蛋白與VEGF蛋白表達(dá)兩者之間無相關(guān)(P＞0.05)（表3.8）.
　　 [結(jié)論]
　　 1、Cavcolin-1蛋白在正常宮頸組織組、慢性宮頸炎組、CINⅠ/Ⅱ組、CINⅢ組及浸潤性宮頸癌組織組中的表達(dá)均呈

17、漸進(jìn)性降低，Caveolin-1蛋白在宮頸癌中的表達(dá)與腫瘤大小、浸潤深度、區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均密切相關(guān)，提示其表達(dá)的降低是宮頸癌發(fā)生中的早期事件，可能參與了宮頸癌的發(fā)展過程，是早期識(shí)別具有高度浸潤和轉(zhuǎn)移潛能宮頸癌的重要指標(biāo)，也是判斷預(yù)后的一個(gè)重要指標(biāo)。
　　 2、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在正常宮頸組織、慢性宮頸炎、CINⅠ/Ⅱ、CINⅢ及浸潤性宮頸癌組織中的表達(dá)呈漸進(jìn)性增高，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在宮頸癌中的表達(dá)與病理分級(jí)