肝癌特異性結合肽篩選及合成的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、華中科技大學博士學位論文肝癌特異性結合肽篩選及合成的實驗研究姓名：朱小華申請學位級別：博士專業(yè)：影像醫(yī)學與核醫(yī)學指導教師：吳華2003.4.1華中科技大學嗣濟醫(yī)學院禧士學位論文ABSTRACTObjective：Thepresentstudywasperformedtoscreenandisolatehomingpeptidesthatbindspecifically，orpreferentially，tohepatocarcinoma

2、cellsusingphagedisplayofrandompeptidelibrariesandwholecellpanningtechniquewiththepurposeofdevelopinganewpeptidewhichmaybeusedasthecarrierindiagnosticimagingordrug—targetdeliveryMethods：Apeptide12一merphagedisplay1ibrarywa

3、susedtoisolatepeptidethatbindtohumanhepatocarcinomacell，andfourroundssubtractivepanningwerecarriedoutwiththehumanhepatocarcinomacell1ineHepG2asthetargetTheaffinitiesofselectedphageclonestohumanhepatocarcinomacellweredete

4、rminedwithELISAandcomparedwithhumaniivercellandothertumorcellSrespectivelyThesinglestrandedDNAofphagesthatbindhumanhepatocarcinomacellspecificallywereextractedandpurified，thentheiraminoacidsequenceswerededucedthoughDNAse

5、quencingInaddition，imunofluorescenceanalysisbyconfocal1ightmicroscopywasperformedtoobservethebindingsiteA16merpeptide(1】|IHl6)wassynthesizedaccordingtotheDNAsequenceresultsItwaspurifiedbyreverse—phasehigh—performanceliqu

6、idchromatographyMassspectrometrywasusedtoconfirmthepredictedmaSSThebindingabilityofWIll6WaSdeterminedwithcompetitiveinhibitiontestResults：Afterfourroundspanning，thephagethatboundtoandinternalizedinhumanhepatocarcinomacel

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