前列腺素E-,1-對(duì)慢性阻塞性肺疾病模型大鼠氣道炎癥干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一種可以預(yù)防可以治療的疾病，具有某些顯著的肺外效應(yīng)，可能與患者個(gè)體嚴(yán)重程度有關(guān)。肺部特點(diǎn)表現(xiàn)為不完全可逆，常呈進(jìn)行性發(fā)展，與肺部對(duì)有害氣體或顆粒的異常反應(yīng)有關(guān)。COPD由于其患病人數(shù)多，死亡率高，社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)重，已成為一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題，是嚴(yán)重危害人類身體健康的重要慢性呼吸系統(tǒng)疾病。其發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，以中性粒細(xì)胞為主要效應(yīng)細(xì)胞的氣道炎癥反應(yīng)是其發(fā)病的主要機(jī)制之一，氣道炎癥涉及多種炎癥細(xì)胞及細(xì)

2、胞因子，腫瘤壞死因子α(TNF—α)、白細(xì)胞介素8(IL-8)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF—β1)等細(xì)胞因子在氣道炎癥中有著重要作用。前列腺素E1(PGE1)是前列腺素的一種，臨床上主要用于改善微循環(huán)功能，近年發(fā)現(xiàn)PGE1可以通過(guò)抑制FNF—α、TGF—β1等因子的表達(dá)來(lái)拮抗急性肺損傷、肺纖維化和支氣管哮喘的氣道炎癥反應(yīng)，但對(duì)COPD氣道炎癥的影響未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本課題通過(guò)觀察PGE1對(duì)COPD模型大鼠氣道中TNF—α和TGF—β1及動(dòng)脈血

3、氣等因素的影響，為PGE1治療COPD在臨床中應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為COPD的治療提供新的思路。 目的：通過(guò)觀察PGE1對(duì)COPD模型大鼠動(dòng)脈血?dú)狻⒎谓M織病理學(xué)變化、支氣管肺泡灌洗液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類以及對(duì)肺組織TNF—α、TGF—β1等因子的表達(dá)的影響，探討PGE1對(duì)COPD模型大鼠氣道炎癥的干預(yù)作用及可能機(jī)制。 方法：30只Wistar大鼠隨機(jī)分為3組：對(duì)照組、模型組和治療組，每組10只。氣道內(nèi)滴注脂多糖(LPS)和熏

4、煙法建立COPD模型，治療組在第2-28天(第15天除外)在熏煙前將前列腺素E1脂微球載體制劑(凱時(shí))2ml溶于8ml生理鹽水，按0.25ml·(0.1kg)-1從尾靜脈注入大鼠體內(nèi)，28天后對(duì)大鼠行血?dú)夥治鰷y(cè)定，然后處死大鼠，收集支氣管肺泡灌洗液(BALF)，對(duì)炎癥細(xì)胞行總數(shù)和分類計(jì)數(shù)，對(duì)大鼠肺組織行病理學(xué)檢查，采用二步法免疫組化法測(cè)定肺組織TGF—β1的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定BALF中TNF—α的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈

5、反應(yīng)(RT—PCR)測(cè)定肺組織中FNF—α mRNA和TGF—β1 mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果：1．根據(jù)大鼠動(dòng)脈血?dú)夥治黾按笫蠓谓M織病理學(xué)檢查判定所建立的大鼠COPD模型的病理學(xué)改變符合人類COPD的特點(diǎn)。2．治療組(88.36±2.26)mmHg、(84.19±1.82)％動(dòng)脈血?dú)夥治鲅醴謮汉脱躏柡投容^模型組(75.66±3.74)mmHg、(77.68±2.89)％明顯改善，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。3．治療組肺

6、組織的病理學(xué)改變較模型組明顯減輕但未恢復(fù)正常。4．治療組(5.655±2.131，0.819±0.310)×106/L BALF中白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞數(shù)較模型組(10.556±2.996，2.417±0.687)×106/L下降。差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。5．治療組(730.750±53.758)pg/ml肺組織TNF—α含量較模型組(930.700±65.221)pg/ml下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但仍高于對(duì)照

7、組(331.000±77.084)pg/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。6．治療組(2.250±1.165)肺組織TGF—β1的表達(dá)計(jì)分較模型組(5.900±1.370)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但高于對(duì)照組(0.700±0.823)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。7．治療組(1.095±0.207、0.781±0.200)肺組織TNF—α mRNA、TGF—β1 mRNA的表達(dá)較模型組(1.448±0.266

8、、1.063±0.202)下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但仍高于對(duì)照組(0.723±0.137、0.365±0.087)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。 結(jié)論：氣道內(nèi)滴入LPS和被動(dòng)吸煙的方法建立COPD的大鼠模型符合人類COPD發(fā)生發(fā)展的病理生理狀況，動(dòng)脈血?dú)夥治雠c肺組織病理學(xué)聯(lián)合觀察可以作為判斷COPD大鼠模型造模成功的標(biāo)準(zhǔn)之一。PGE1可以明顯改善COPD大鼠動(dòng)脈血氧分壓及氧飽和度水平，減輕肺氣腫改變；TNF