阿托伐他汀對(duì)Aβ小鼠認(rèn)知障礙的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、隨著人口老齡化的出現(xiàn)，阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)的發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)，預(yù)測(cè)到2050年將超過9000萬。由于缺乏有效的預(yù)防、診斷和治療措施，AD已成為死亡病因的第四位。他汀類藥是膽固醇合成中限速酶3-羥基-3-甲基戊二酰CoA(HMG-CoA)還原酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，作為降膽固醇藥已廣泛應(yīng)用于防治動(dòng)脈粥樣硬化。流行病學(xué)資料顯示，他汀類藥能降低AD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，特別在有腦血管疾病的患者。臨床資料表明，阿托伐

2、他?。ˋtorvastatin, ATV）能改善輕中度AD患者的認(rèn)知障礙，延緩AD的病程進(jìn)展，但其確切的分子機(jī)制仍然不清楚。β-淀粉樣蛋白(Amyloid-beta, Aβ)是附著在小膠質(zhì)細(xì)胞的必需結(jié)構(gòu)域，觸發(fā)胞漿IkBα降解和NF-κB p65核內(nèi)移，啟動(dòng)促炎癥因子、趨化因子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控和釋放，誘發(fā)神經(jīng)炎性反應(yīng)。小膠質(zhì)細(xì)胞釋放神經(jīng)炎性因子能損害神經(jīng)系統(tǒng)的功能和導(dǎo)致神經(jīng)元的退行性變性。有研究報(bào)道，他汀類藥物通過激活PI3K-Akt信號(hào)通路

3、能抑制Aβ誘導(dǎo)氧化應(yīng)激和腦的炎癥反應(yīng)，減少Aβ的神經(jīng)毒作用。
　　目的：⑴確定ATV是否能改善Aβ25-35小鼠的認(rèn)知功能障礙；⑵通過觀察ATV對(duì)Aβ25-35小鼠海馬炎癥反應(yīng)的作用，以闡明ATV抗癡呆治療作用的機(jī)制。
　　方法：①Aβ25-35小鼠模型制備:將Aβ25-35進(jìn)行小鼠的側(cè)腦室注射，制作AD小鼠模型。以相同體積的生理鹽水進(jìn)行側(cè)腦室注射作為對(duì)照。于Aβ25-35注射后4小時(shí)開始給予阿托伐他汀灌胃，每天一次。②行為

4、學(xué)檢查:Morris水迷宮檢測(cè)與海馬相關(guān)的空間認(rèn)知功能;Y迷宮檢測(cè)短時(shí)空間記憶能力。③海馬的電生理學(xué)檢測(cè):制備小鼠海馬腦切片。電刺激Schaffer纖維，記錄CA1區(qū)興奮性突觸后電位(EPSP)的斜率和誘導(dǎo)長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LTP)。④免疫細(xì)胞染色:進(jìn)行海馬CA1區(qū)星型膠質(zhì)細(xì)胞（GFAP）和小膠質(zhì)細(xì)胞(Iba1)檢測(cè)和計(jì)數(shù)。⑤用Western blot、RT-PCR分析:檢測(cè)炎性因子IL-1β、TNF-α表達(dá)和水平。
　　結(jié)果：⑴與對(duì)照

5、組小鼠相比，Aβ25-35小鼠在水迷宮的登臺(tái)潛伏期明顯延長(zhǎng)，軌跡實(shí)驗(yàn)的站臺(tái)象限的游泳時(shí)間減少，Y迷宮中自發(fā)交替行為即短時(shí)空間記憶能力降低----Aβ25-35小鼠的空間認(rèn)知功能降低。⑵ATV（10mg/kg/天）灌胃10天治療可以減少Aβ25-35小鼠登臺(tái)潛伏期，增加Aβ25-35小鼠在站臺(tái)象限的游泳時(shí)間和提高Y迷宮中自發(fā)交替行為----ATV具有抗癡呆作用。⑶與對(duì)照組小鼠相比，Aβ25-35小鼠Schaffer-CA1突觸的EPSP斜

6、率明顯降低，長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)（LTP）不能誘導(dǎo)——Aβ25-35損害突觸功能和突觸可塑性。⑷ATV治療能增加Aβ25-35小鼠Schaffer-CA1突觸的EPSP斜率和恢復(fù)LTP的誘導(dǎo)----ATV能拮抗Aβ25-35的神經(jīng)損害作用。⑸與對(duì)照組小鼠相比，Aβ25-35小鼠海馬CA1區(qū)Iba-1陽性細(xì)胞數(shù)明顯增加，IL-1β mRNA水平及IL-1β蛋白水平增加，TNF-α mRNA和TNF-α蛋白表達(dá)水平也都明顯增加----Aβ25-35誘

7、導(dǎo)神經(jīng)炎性反應(yīng)。⑹ATV治療可明顯減少Aβ25-35小鼠海馬的Iba-1陽性細(xì)胞數(shù)，降低IL-1β和TNF-α的水平----ATV能減弱Aβ25-35誘導(dǎo)神經(jīng)炎性反應(yīng)。⑺在Aβ25-35小鼠，用FOH以補(bǔ)充異戊二烯中間體可以阻斷ATV的抗癡呆作用，ATV的抗炎性作用和神經(jīng)保護(hù)作用----ATV通過降低異戊二烯中間體發(fā)揮抗癡呆作用。⑻與對(duì)照組小鼠相比，Aβ25-35小鼠海馬CA1區(qū)Akt磷酸化水平明顯降低，而ATV治療能增加Aβ25-35