P53和Bcl-2在大鼠SAH后早期腦損傷中的表達(dá)及意義.pdf

1、前言
　　 蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage SAH)發(fā)生率在西方國(guó)家約10人/10萬(wàn)人，腦血管痙攣和早期腦損傷是患者致死和致殘的主要因?yàn)?，約12.4％患者在入院前已發(fā)生猝死，出血48小時(shí)內(nèi)的死亡率高達(dá)40％-60％，約35％在SAH后24小時(shí)內(nèi)死亡?；颊咧滤?、致殘的主要因?yàn)槭浅鲅蟮哪X血管痙攣(cerebralvasospasm，CVS)和早期腦損傷(early brain injury，EBI)

2、。早期腦損傷病理生理學(xué)包括血腦屏障(BBB)的破壞、腦水腫及神經(jīng)細(xì)胞凋亡，凋亡受到多種相關(guān)基因的調(diào)控，這些基因已經(jīng)被證實(shí)在早期腦損傷和遲發(fā)性血管痙攣血管壁和腦組織中存在表達(dá)。P53和Bcl-2則被認(rèn)為是抑制和促進(jìn)細(xì)胞凋亡最重要的基因。延緩或阻止凋亡的發(fā)生和發(fā)展，有望為腦血管痙攣和早期腦損傷防治找到一條新的途徑。本研究采用血管內(nèi)穿刺法建立大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血?jiǎng)游锬Ｐ?，探討P53和Bcl-2在在大鼠SAH后早期腦損傷中的表達(dá)及意義。
　

3、　 材料和方法
　　 按文獻(xiàn)所述，建立標(biāo)準(zhǔn)大鼠血管內(nèi)線穿刺法SAH動(dòng)物模型。健康成年SD大鼠144只(體重300-350mg，雄性)，取24只隨機(jī)分為假手術(shù)組、SAH組和SP600125(30mg/kg組)，每組8只，為SAH后12小時(shí)處理組。另外120只隨機(jī)分為6組：對(duì)照組(n=20)，假手術(shù)組(n=20)，SAH組(n=20)，SAH+DMSO組(n=20)，SAH+10mg/kg(SP600125)(n=20)和SAH+

4、30mg/kg(SP600125)(n=20)。SP600125(JNK抑制劑)溶解于DMSO溶液中，分別于制備蛛網(wǎng)膜下腔出血?jiǎng)游锬Ｐ颓?小時(shí)和蛛網(wǎng)膜下腔出血后6小時(shí)腹腔注射。同樣劑量的DMSO(不含抑制劑)腹腔注射SAH組作為SAH+DMSO組。免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)鼠腦皮層和海馬區(qū)P53、Bcl-2蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果
　　 1、P53在大腦皮質(zhì)和海馬的陽(yáng)性表達(dá)為細(xì)胞核呈棕黃色或棕褐色顆粒粒，伴有少量胞漿表達(dá)。正常

5、組同假手術(shù)組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)：SAH組和SAH+DMSO組同對(duì)照組比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；SAH組同SAH+DMSO組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。SAH組不同時(shí)點(diǎn)(12h和24h)P53的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。SP600125(30mg/kg)組P53表達(dá)下降(P<0.01)。
　　 2、Bcl-2在大腦皮質(zhì)和海馬的陽(yáng)性表達(dá)為，胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色顆粒。其在正常腦皮質(zhì)和海馬均有

6、一定程度的表達(dá)。正常對(duì)照組和假手術(shù)組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；SAH組中較對(duì)照組和假手術(shù)組Bcl-2表達(dá)明顯減少(P<0.01)；SAH組、SAH+DMSO組和SP600125(10mg/kg)組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；SAH組不同時(shí)點(diǎn)(12h和24h)Bcl-2的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；SP600125(30mg/kg)組Bcl-2表達(dá)升高(P<0.01)。
　　 3、JNK抑制劑SP600125可