新生期結直腸刺激對幼鼠內臟痛敏感性的影響及脊髓c-fos蛋白的表達.pdf

1、目的：采用行為學和電生理評價方法，探討新生期傷害性結直腸擴張刺激(CI)對幼鼠內臟痛覺敏感性影響，并建立幼鼠內臟痛覺高敏感模型。通過觀察內臟高敏感幼鼠腰骶段脊髓背角c-fos蛋白表達，探討幼鼠出現(xiàn)內臟痛覺高敏的作用機制。 方法：[1]32只SD乳鼠隨機分成實驗組和對照組，每組16只；實驗組乳鼠出生第8天開始給予CI，每日1次，連續(xù)7d，對照組不給予CI，常規(guī)飼養(yǎng)到幼鼠期(6周齡)進行下列研究：①結直腸擴張(CRD)刺激下腹壁撤退

2、反射(AWRl)和痛閾測定評估腸道痛覺敏感性；②降結腸病理學檢查；⑧CRD刺激下腹外斜肌放電法評估腸道痛覺敏感性。[2]32只SD乳鼠按析因設計分成4組，每組8只，A組為模型組并在6周齡時接受CRD，B組為模型組，6周齡未給予CRD，C組為對照組，6周齡接受CRD，D組為對照組，6周齡未給予CRD。A、C組幼鼠CRD接受刺激后2小時和B、D組幼鼠留取L<,6>至S<,2>脊髓，應用免疫組織化學染色及計算機圖像分析系統(tǒng)進行脊髓Fos陽性(

3、FLI)細胞數(shù)和灰度積分值半定量分析。采用SPSS11.0軟件包進行統(tǒng)計分析，α=0.05為顯著性檢驗標準。 結果：[1]隨CRD增加，幼鼠AWR評分增加：AWR評分受新生期接受CI(造模)及性別影響(F值為45.19、7.44，p<0.05)，AWR評分雌性明顯高于雄性，實驗組明顯高于對照組，性別與造模有明顯交互作用(F=4.66，p=0.040)：實驗組與對照組AWR評分在CRD20、40mmHg時差異明顯，CRD60、80

4、mmHg時差異不明顯。實驗組和對照組幼鼠痛閾值為26.5±4.9mmHg、47.8±5.0mmHg(F=149.753，p<0.01)。[2]隨CRD增加，幼鼠腹外斜肌放電波幅增加；腹外斜肌放電波幅受造模及性別影響(F值為7.09、5.95，p<0.05)；腹外斜肌放電波幅雌性明顯高于雄性，實驗組明顯高于對照組，實驗組與對照組腹外斜肌放電幅值在CRD30、45mmHg時有明顯差異，CRD 60mmHg、75mmHg時差異不明顯。兩組幼鼠

5、體重無差異，降結腸未見明顯病理組織損傷。[3]新生期CI和幼鼠6周齡時CRD均可使幼鼠腰骶段脊髓背角FLI細胞數(shù)顯著升高，F(xiàn)LI灰度積分值顯著降低，差別均有統(tǒng)計學意義；CI和CRD對脊髓背角FLI灰度積分值的影響有交互作用。 結論：新生期持續(xù)CI可造成幼鼠痛閾下降，出現(xiàn)慢性內臟高敏感性，且沒有明確的組織病理學改變，為幼鼠內臟高敏性模型。與行為學評價相比，電生理評價方法為定量檢測，能較為客觀反映動物內臟痛覺的致敏效應，特別適用于幼