芪丹通脈片對海馬缺血大鼠學習記憶的影響及機制的實驗研究.pdf

1、本實驗即通過光化學法建立大鼠海馬梗死模型，然后給予藥物，觀察芪丹通脈片對實驗性大鼠海馬缺血性損傷后學習記憶的影響，觀察芪丹通脈片對缺血大鼠腦組織病理形態(tài)學及HSP70表達的影響，并對其腦保護機制進行了探討。　　研究方法和內容： 1.動物模型的建立采用光化學法誘導大鼠海馬梗死模型，以70mg/kg體重的虎紅聯合冷光源進行雙側海馬照射，24h后觀察其組織病理學改變。 2.造模后大鼠行為學評估成年雄性SD大鼠84只，體質量2

2、00±20g，隨機分為7組，每組12只，分別是空白對照組(control)、假手術組(sham-operatedgroup)、模型組(modelgroup)、QDTMH組(3.24g/kg.d)、QDTMM組(1.08g/kg.d)、QDTML組(0.36g/kg.d)、華佗再造丸組(HTZZ)。除空白對照組和假手術組外，其余各組大鼠均采用光化學法誘導大鼠雙側海馬梗死模型。造模后各組動物每日灌胃給藥。分別在大鼠造模前、造模后3d、5d、

3、7d，用Morris水迷宮觀測大鼠的平均逃避潛伏期，評價各組大鼠空間學習記憶能力的變化。 3.標本采集與處理行為學評估后，無菌條件下開胸，暴露心臟灌注固定。經主動脈，先用生理鹽水100ml快速沖洗血液，再用4％多聚甲醛灌注固定兩小時。開顱取腦，標本置于4℃下后固定。 4.缺血灶病理形態(tài)學觀察對標本進行固定、脫水、包埋等處理，分別于光、電鏡下觀察形態(tài)改變。 5.HSP70免疫陽性細胞觀察按照說明書的操作順序進行AB

4、C免疫組化染色，鏡下觀察各組海馬及其周圍皮質部位HSP70陽性細胞數。 實驗結果： 1.經虎紅聯合冷光源照射，可誘導大鼠海馬梗死。術后大鼠表現為倦怠乏力、反應遲鈍、舌質絳紫暗淡，鼠毛干枯接穗，呈氣虛血瘀證表現。未見大鼠有明顯的肢體活動障礙。光鏡下觀察到缺血灶位于海馬區(qū)內。梗死灶與周圍正常組織區(qū)別明顯，胞質嗜伊紅性增強呈粉紅色。大鼠神經行為學及病理形態(tài)學明顯為缺血性改變。 2.水迷宮結果提示，造模前各組大鼠平均逃避

5、潛伏期組間差異無顯著性意義。大鼠海馬梗死后較梗死前學習記憶能力下降(P＜0.01)；在造模后3d、5d、7d，QDTMT各給藥組大鼠平均逃避潛伏期較模型組明顯縮短，組間差異有顯著性意義(P＜0.05)。 3.光鏡下可觀察到明顯梗死灶，胞質嗜伊紅性增強呈粉紅色，組織壞死脫落明顯。電鏡結果顯示，各組大鼠缺血部位神經細胞超微結構損傷程度不同。較之模型組，各中藥給藥組大鼠缺血后形態(tài)學損傷表現為不同程度的減輕。 4.HSP70免疫

6、組化染色結果表明，模型組陽性細胞表達最少，中藥治療組陽性細胞數表達較模型組增多(P＜0.01)，且各劑量組間比較有差別(P＜0.05)，QDTMTH組表達最多。假手術組未見表達。 研究結論與提示： 1.QDTMT能改善雙側海馬梗死大鼠學習記憶能力。 2.QDTMT能減輕大鼠海馬梗死的形態(tài)損傷程度，對局部缺血性腦損傷有一定的保護作用。 3.QDTMT能增強海馬梗死大鼠腦中HSP70的表達，可能是其腦保護作用