食管鱗狀細(xì)胞癌中基因的異常表達(dá)及其臨床意義的研究.pdf

1、目的：研究人食管鱗狀細(xì)胞癌與癌旁正常組織的基因表達(dá)譜，通過對比基因表達(dá)的差異，尋找與人食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展相關(guān)的基因。
　　方法：1.應(yīng)用基因芯片技術(shù)檢測食管鱗癌中的差異表達(dá)基因。提取人食管鱗癌組織與癌旁正常組織的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，并用Cy3-dUTP標(biāo)記正常食管組織，用Cy5-dUTP標(biāo)記食管鱗癌組織，制成探針，與基因芯片進(jìn)行雜交，經(jīng)掃描儀掃描后，對獲取的信號數(shù)據(jù)進(jìn)行軟件分析、對比，篩選出差異表達(dá)的基因；
　　2.

2、應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法對差異表達(dá)的NFκB和CyclinD1以及相關(guān)的C-Src和 EGFR進(jìn)行蛋白表達(dá)的檢測，探討其與食管鱗癌發(fā)生發(fā)展及生物學(xué)行為的關(guān)系。
　　結(jié)果：1.應(yīng)用基因芯片技術(shù)檢測4例食管鱗狀細(xì)胞癌及癌旁正常組織的新鮮標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)4329條基因發(fā)生差異表達(dá)，其中2293條上調(diào)，2036條下調(diào)，根據(jù)GO（gene ontology）分類，將這些基因按GO分子功能（function term）分為37類，其中與細(xì)胞分化、成熟，

3、分子定位、連接，信號傳導(dǎo)，酶活性調(diào)節(jié)，以及基因轉(zhuǎn)錄、翻譯調(diào)節(jié)有關(guān)的基因最多；2.表達(dá)上調(diào)的NFκB具有5種分子功能，參與多種生物學(xué)過程，在細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化過程中起重要作用。3.在差異表達(dá)的基因中有許多基因與NFκB有相同的功能。4.用免疫組織化學(xué)方法檢測表達(dá)上調(diào)的NFκB和CyclinD1以及C-Src和EGFR的蛋白表達(dá)情況。在100例食管鱗癌組織及30例正常對照食管組織中，NFκB在正常上皮無表達(dá)(0％，0/30)，在癌組織中表達(dá)顯著

4、增強(qiáng)（61%，61/100），兩者相比有統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05），但表達(dá)強(qiáng)度與食管癌的分化程度、浸潤深度無關(guān)（p>0.05），而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(p<0.05)；CyclinD1在正常鱗狀上皮中有表達(dá)（33.33%，10/30），在癌組織中表達(dá)增強(qiáng)（57%，57/100），兩者相比有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05），在癌組織中表達(dá)強(qiáng)度與組織學(xué)分級及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(p<0.05),與浸潤深度無關(guān)（p>0.05）；C-Src在正常上皮中有表達(dá)（

5、20%，6/30），在癌組織中表達(dá)增強(qiáng)（59%，59/100），兩者相比有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05），在癌組織中表達(dá)強(qiáng)度與分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均相關(guān)（p<0.05）；EGFR在正常上皮中有表達(dá)（30%，9/30）,在癌組織中表達(dá)增強(qiáng)(67%，67/100)，兩者相比有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05），在癌組織中表達(dá)強(qiáng)度與分化程度及浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均相關(guān)（p<0.05）。5.在食管鱗癌中，NFκB和CyclinD1、C-Src、E

6、GFR蛋白表達(dá)具有相關(guān)性（p<0.05）。
　　結(jié)論：1.食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展與多基因的異常表達(dá)有關(guān)。2.應(yīng)用基因芯片技術(shù)可以對食管鱗癌的基因表達(dá)譜進(jìn)行分析，以篩選食管鱗癌相關(guān)基因。3. NFκB在食管鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)增強(qiáng)，但與食管鱗癌的分化程度、浸潤深度無關(guān)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，提示NFκB可能參與食管鱗癌的發(fā)生和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。4.CyclinD1在癌組織中表達(dá)增強(qiáng)，且表達(dá)強(qiáng)度與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)；EGFR，C-Src在癌組織