激動(dòng)劑-拮抗劑作用下大鼠牙周組織7nAChRα表達(dá)的研究.pdf

1、吸煙是慢性牙周炎的主要危險(xiǎn)因素。吸煙相關(guān)性牙周炎的典型特征是牙周附著喪失，牙周袋形成，牙槽骨缺失，最終導(dǎo)致牙齒缺失。尼古丁作為煙草中的主要生物堿，對(duì)牙周組織可造成多種損害，但確切的作用機(jī)制至今仍未明了。研究發(fā)現(xiàn)，7α煙堿型乙酰膽堿受體（7α nicotine acetylcholine receptor，7αnAChR）可能與煙草毒性相關(guān)。本研究擬在前期研究的基礎(chǔ)上，通過(guò)牙周炎動(dòng)物模型，MicroCT，免疫組化等技術(shù)手段，研究7nACh

2、Rα在大鼠牙周組織的分布及其在受體激動(dòng)劑尼古丁，拮抗劑美加明、α-銀環(huán)蛇毒素作用下表達(dá)的改變，及相應(yīng)牙周組織炎癥的變化情況，以期探討αnAChR在尼古丁與牙周炎發(fā)生發(fā)展中的作用，為尋找新的牙周炎防治途徑提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　1、尼古丁/美加明作用下大鼠牙周組織7nAChRα的表達(dá)
　　雄性SD大鼠16只，200g±10g。應(yīng)用絲線結(jié)扎上頜右側(cè)第二磨牙，建立實(shí)驗(yàn)性牙周炎模型，將其隨機(jī)分為對(duì)照組(C)，生理鹽水組(S)，尼古

3、丁組(NT)，尼古丁+美加明組(MEC)，每組4只。分別于首次給藥后第14、28天處死每組各一半大鼠。通過(guò)牙周臨床指標(biāo)檢測(cè)及HE染色觀察牙周組織炎癥程度，利用免疫組化及半定量分析，觀察比較上頜第二磨牙牙周組織中7nAChRα的表達(dá)。結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)性牙周炎大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞、成骨細(xì)胞等均可見(jiàn)7nAChRα陽(yáng)性染色；與對(duì)照組相比，尼古丁組牙周膜7nAChRα染色增強(qiáng)(P<0.05)，同時(shí)齦溝出血指數(shù)和牙周探診深度值增高(P<0.05)；而

4、受體拮抗劑美加明可抑制尼古丁的作用(P<0.05)。初步證實(shí)，7nAChRα可能作為尼古丁的靶受體，在吸煙相關(guān)性牙周炎的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要作用。
　　2、尼古丁/α－BTX作用下大鼠牙周組織7nAChRα的表達(dá)
　　雄性SD大鼠24只，體重180±20g。隨機(jī)分為對(duì)照組，生理鹽水組(S)，尼古丁組（NT），尼古丁+α-BTX(BTX)（n=6）。其中對(duì)照組右側(cè)為單純絲線結(jié)扎對(duì)照（L），左側(cè)為空白對(duì)照(C)。大鼠麻醉狀態(tài)下，

5、采用3-0絲線結(jié)扎對(duì)照組右側(cè)，及其他組雙側(cè)上頜第二磨牙頸部。次日起，NT組腹腔注射尼古丁1.7mg/kg/d。BTX組在尼古丁給藥前30分鐘，腹腔注射α-BTX10g/kg/dμ，S組注射等量生理鹽水。分別于首次給藥后第14、28天處死每組各一半大鼠。取雙側(cè)上頜磨牙段，行MicroCT掃描分析，并常規(guī)制作石蠟切片。
　　大體檢查及HE結(jié)果顯示，尼古丁可以加重絲線結(jié)扎引起的牙周炎癥狀，提前給予α-BTX，可在一定程度上遏制尼古丁的作

6、用。Microview三維分析結(jié)果顯示，28天時(shí)，L，S組與C組相比，有明顯的牙槽骨喪失(P<0.05)，且L，S組間無(wú)明顯差異(P>0.05)；NT組與L，S組相比，牙槽骨喪失更為顯著(P<0.05)；BTX組與NT組相比，牙槽骨喪失較輕（P<0.05）；但BTX組與L組相比，有差異但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。免疫組化結(jié)果表明，給予尼古丁后，大鼠牙周膜組織中7nAChRα的表達(dá)增強(qiáng)；而預(yù)先給予受體拮抗劑α-BTX，則尼古丁對(duì)7nA