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1、福建醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文NFκB信號(hào)通路對(duì)大鼠變應(yīng)性鼻炎鼻粘膜上皮細(xì)胞水通道蛋白5表達(dá)的影響及變應(yīng)性鼻炎高分泌性機(jī)制的研究姓名:王偉偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師:鄭鳴20100301檢測(cè)各組鼻粘膜組織NFrBp65、pCREB(Serl33)、AQP5、IL1p及TNF—a表達(dá)。6Westernblotting檢測(cè)各組鼻粘膜組織粘蛋白5AC(MUC5AC)和粘蛋白5B(MUCSB)表達(dá)?!窘Y(jié)果】1采用差速貼壁法和
2、條件限定培養(yǎng)基,可成功純化和培養(yǎng)鼻粘膜上皮細(xì)胞。免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定鼻粘膜上皮細(xì)胞純度可達(dá)95%。2H89和forskolin干預(yù)對(duì)大鼠鼻粘膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)顯著影響。H89(3I_tM)干預(yù)12h和24h后,pCREB(Serl33)和AQP5陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組明顯減少,pCREB(Serl33)蛋白、AQP5蛋白及AQPSmRNA表達(dá)較對(duì)照組明顯減少;Forskolin(19M)干預(yù)12h和24h后,pCREB(Serl33)和AQP
3、5陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較對(duì)照組明顯增多,pCREB(Serl33)蛋白和AQP5蛋白及AQP5mRNA表達(dá)較對(duì)照組明顯增多。3通過(guò)卵清蛋白全身和局部致敏建立SD大鼠AR模型,HE染色顯示模型組鼻粘膜組織纖毛脫落、倒伏,血管、腺體增多,Wright’S染色顯示模型組嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn);外周血lee水平增高;行為學(xué)積分較對(duì)照組明顯增高。4與對(duì)照組相比,模型組鼻粘膜組織NFrBp65平均光密度值和蛋白表達(dá)明顯增多,IL1p、TNFa及IL6mRNA表達(dá)明
4、顯增多,pCREB(Serl33)平均光密度和蛋白表達(dá)減少,AQP5平均光密度值、蛋白表達(dá)和mRNA表達(dá)減少;PDTC(100mg/kg/dand50mg/kg/d)干預(yù)1d、3d和5d后,NFv_Bp65平均光密度值和蛋白表達(dá)較模型組減少,IL1p、TNFa及IL113mRNA表達(dá)較模型組減少,pCREB(Serl33)平均光密度值和蛋白表達(dá)較模型組增多,AQP5平均光密度值、蛋白表達(dá)和mRNA表達(dá)較模型組增多。5H89(5mg/kg
5、/d)干預(yù)1d、3d和5d后,NF—vcBp65平均光密度值和蛋白表達(dá)較模型組增多,IL113及TNFamRNA表達(dá)較模型組增多,pCREB(Serl33)平均光密度和蛋白表達(dá)較模型組減少,AQP5平均光密度值、蛋白表達(dá)和mRNA表達(dá)較模型組減少;Forskolin(Smg/kg/d)干預(yù)1d、3d和5d后,NFr_Bp65平均光密度值和蛋白表達(dá)較模型組減少,IL1B及TNFamRNA表達(dá)較模型組減少,P—CREB(Serl33)平均光
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